1、本研究利用一段編碼(G4S)3多肽的堿基linker將IBV S1和IBV M基因進行克隆。免疫熒光結(jié)果表明融合基因能夠在細胞內(nèi)進行表達。
　　 動物免疫試驗共分6組：M組(免疫IBV M基因真核表達質(zhì)粒)、S1-M組(PVAX-S1-linker-M融合基因真核表達質(zhì)粒)、病毒對照組V(IBV-Beaudette株)，PBS組，疫苗組，以及1個空載體對照組。免疫過程中利用淋巴細胞增殖試驗、酶聯(lián)免疫吸附試驗、中和抗體試驗以及利用

2、流式細胞術(shù)檢測CD4+、CD8+T淋巴細胞動態(tài)變化，對不同日齡的試驗動物進行檢測，最后用病毒攻擊試驗比較免疫不同質(zhì)粒組別之間保護率。
　　 試驗結(jié)果表明，4組免疫組各日齡多數(shù)免疫指標(biāo)都高于空載體對照組和PBS組，對M組及SIM組比較時發(fā)現(xiàn)，S1-M組可以較早地誘導(dǎo)機體產(chǎn)生細胞免疫及體液免疫應(yīng)答。PVAX-S1-linker-M組最為顯著說明二價核酸疫苗對兩種病毒的攻擊有一定的保護作用，攻毒后對各試驗組IBV靶器官進行了病理組織學(xué)

3、研究，同時還對不同免疫組之間的免疫保護率進行了比較，結(jié)果進一步證明了PVAX-S1-linker-M能夠很好地提高機體的免疫保護能力，抵御病毒感染的能力更為突出，表明在linker幫助下融合基因能夠在機體內(nèi)更好地發(fā)揮二者的生物學(xué)協(xié)同作用。
　　 綜上，通過本試驗研究表明，IBV抗原S1和M聯(lián)合基因免疫不但能夠促進機體的細胞免疫應(yīng)答能力，而且能夠提高機體體液免疫應(yīng)答的能力，進而促進機體產(chǎn)生較強的免疫力以抵抗病毒的攻擊。本試驗結(jié)果為