大豆種質(zhì)脂肪酸主要組分鑒定與QTL標記定位.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、大豆[Glycin Max(L.)Merr.]原產(chǎn)于我國,是重要的植物蛋白質(zhì)與油脂的來源。大豆油中富含人體必需的脂肪酸如油酸、亞油酸和亞麻酸等,其品質(zhì)優(yōu)劣主要由其所含的脂肪酸種類和含量配比所決定的。我國大豆種質(zhì)資源十分豐富,不同生態(tài)區(qū)大豆品質(zhì)特性存在顯著差異。建立快速、簡捷的脂肪酸組分含量檢測方法,分析不同年份不同生態(tài)區(qū)大豆種質(zhì)資源的脂肪酸組分含量的變異及與農(nóng)藝和品質(zhì)性狀的相關(guān)性,對開展大豆脂肪酸品質(zhì)育種,改善大豆脂肪酸組成,提高必需脂

2、肪酸含量,具有重要的理論及實踐意義。利用脂肪酸組分含量顯著差異的大豆種質(zhì)(魯黑豆2號和南匯早黑豆)雜交衍生的重組自交系群體(RIL,F(xiàn)5:7-8),采用SSR標記結(jié)合數(shù)量性狀QTL定位的方法,構(gòu)建大豆遺傳連鎖圖譜,采用復合區(qū)間作圖法定位與脂肪酸主要組分相關(guān)的QTL,對大豆脂肪酸組分分子標記輔助育種具有一定的指導意義。
   1、大豆脂肪酸組分快速檢測方法的建立
   選取脂肪酸組分含量顯著差異的5份大豆種質(zhì)為材料,采用索

3、氏抽提法、改良的籽粒直接甲酯化法和豆粉直接甲酯化法3種方法處理樣品,利用氣相色譜(GC)技術(shù)分析大豆5種脂肪酸組分棕櫚酸(Palmitic acid)、硬脂酸(Stearic acid)、油酸(Oleic acid)、亞油酸(Linoleic acid)和亞麻酸(Linolenic acid)的含量,并對3種樣品處理方法進行比較分析。結(jié)果顯示籽粒直接甲酯化法簡便快捷,適用于低世代的單籽粒或半籽粒的樣品量較少情況下測定大豆脂肪酸組成;豆粉

4、直接甲酯化法適合大量樣品的快速檢測,可以避免長時間加熱對脂肪酸組分的影響,測定結(jié)果相對準確;索氏抽提法適合樣品量大,檢測精度高,但樣品前處理需要進行油分抽提,費工費時。精密度檢測結(jié)果顯示,改良的籽粒直接甲酯化法和豆粉直接甲酯化法與索氏抽提法在檢測精度上沒有顯著差異,可以用于大豆籽粒的快速脂肪酸含量鑒定。
   2、代表性大豆種質(zhì)的脂肪酸組分含量分析
   采用氣相色譜檢測方法,對來自不同生態(tài)區(qū)的91份代表性大豆種質(zhì)進行脂

5、肪酸組分含量分析,結(jié)果顯示代表性大豆種質(zhì)中主要含有5種脂肪酸組分,即棕櫚酸(10.8%)、硬脂酸(4.24%)、油酸(23.48%),亞油酸(53.58%)和亞麻酸(7.79%),且脂肪酸組分含量在不同年份與生態(tài)區(qū)間、品種間存在顯著差異;相關(guān)分析顯示油酸與棕櫚酸、亞油酸酸和亞麻酸呈極顯著的負相關(guān)(r=-0.32**、-0.85**和-0.46**),而與硬脂酸呈極顯著正相關(guān)(r=0.33**),棕櫚酸與亞麻酸呈顯著正相關(guān)(r=0.31*

6、),亞油酸與亞麻酸呈顯著正相關(guān)(r=0.28*):篩選出高油酸和低亞麻酸組分含量的大豆種質(zhì)2份,分別為赤城綠黃豆(油酸和亞麻酸含量平均值為33.2%和5.7%)和牡豐1號(油酸和亞麻酸含量平均值為32.6%和6.0%);高亞油酸和低亞麻酸組分含量大豆種質(zhì)2份,分別是茶色豆(亞油酸和亞麻酸平均含量為52.7%和6.4%)和方正秣食豆(亞油酸和亞麻酸平均含量為58.26%和5.6%),可以作為大豆親本材料服務于大豆脂肪酸組分育種。
 

7、  3、大豆重組自交系群體(RIL)脂肪酸組分的遺傳表現(xiàn)
   大豆重組自交系(RIL)群體的主要農(nóng)藝性狀表現(xiàn)是不同的,其中以有效分枝、單株莢數(shù)、底莢高度和單株粒數(shù)受環(huán)境條件影響顯著,而株高、百粒重和主莖節(jié)數(shù)受環(huán)境條件影響較小。不同年份間RIL群體的蛋白質(zhì)和油分含量差異不顯著。不同年份間RIL群體的脂肪酸組分含量基本呈正態(tài)分布,表明可以用于大豆脂肪酸組分含量QTL標記定位研究。不同年份間脂肪酸組分含量變異范圍不同,相關(guān)性分析表

8、明不同年份間5種脂肪酸組分間相關(guān)性一致,表明RIL群體的脂肪酸組分含量雖然受環(huán)境條件的影響,但遺傳因素仍是決定脂肪酸組分含量變化的主要因子,充分說明了開展大豆脂肪酸組分含量QTLs分子標記研究是可行的。
   4、大豆遺傳連鎖圖譜的完善及脂肪酸組分含量的QTLs定位
   以組合魯黑豆2號×南匯早黑豆的重組自交系F5:7-8世代為作圖群體(100個家系),利用161個多態(tài)性SSR標記,構(gòu)建了包含20個連鎖群長度為3527

9、cM的遺傳連鎖圖譜,標記間平均距離為22.19 cM。采用ICIMPPING3.0軟件,利用復合區(qū)間作圖法,結(jié)合兩年試驗數(shù)據(jù),對大豆RIL群體脂肪酸組分進行QTL定位并對定位結(jié)果進行比較。
   2009年試驗中,對棕櫚酸、硬脂酸、油酸,亞油酸、亞麻酸和油分6個性狀進行QTL定位,共檢測到13個QTL,。檢測到的QTL分布于A1、M、G、O、K、B2和N連鎖群上,LOD值介于2.62~12.7,分別解釋相應性狀的5.6%~21.

10、39%。其中,亞油酸性狀檢測到1個Q1L(qLA-1),表型貢獻率為11.08%,位于N連鎖群上,與標記Satt530相距0.7 cM;亞麻酸性狀共檢測到2個,總貢獻率為40.37%,分別位于A1和O連鎖群上,表型貢獻率為18.98%~21.39%。
   2010年試驗中共檢測到10個QTL。檢測到的QTL分布于A2、B2、C2、G、M和N連鎖群上,LOD值介于2.58~10.81,分別解釋相應性狀的4.09%~15.82%。

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