1、小麥小孢子培養(yǎng)是一套高效再生體系，可以獲得大量單倍體和加倍單倍體(DH群體)，在單倍體育種中具有重要意義，同時(shí)為遺傳學(xué)和細(xì)胞牛物學(xué)等基礎(chǔ)研究提供了遺傳背景豐富且穩(wěn)定的材料。小麥小孢子培養(yǎng)對(duì)培養(yǎng)技術(shù)及環(huán)境等因素具有嚴(yán)格要求。本試驗(yàn)采用濟(jì)麥20、Pavon等14個(gè)國(guó)內(nèi)外小麥品種，分別對(duì)材料的供應(yīng)，材料預(yù)處理，小孢子的分離純化，培養(yǎng)基、密度及品種等影響因素展開(kāi)研究，為小麥小孢子的培養(yǎng)技術(shù)提供理論依據(jù)。研究結(jié)果如下：
　　 1.研究建立

2、了小孢子培養(yǎng)的材料供應(yīng)體系。在2月份以前通過(guò)分期播種小麥能夠抽穗。3月份以后需要進(jìn)行人工春化，弱冬性品種需要春化20 d，冬性品種需春化20-40d，強(qiáng)冬性品種需春化40 d以上。在大田條件下，能夠?qū)⑿←湹墓?yīng)時(shí)期由4月延長(zhǎng)至7月。解決了小孢子培養(yǎng)中材料供應(yīng)集中、時(shí)期短暫的問(wèn)題。
　　 2.比較了穗子預(yù)處理和小孢子預(yù)處理兩種方法，經(jīng)小孢子預(yù)處理后，小孢子啟動(dòng)數(shù)和胚狀體大小顯著高于穗子預(yù)處理。
　　 3.優(yōu)化了小孢子準(zhǔn)備程

3、序。小麥穗子先用2.0％次氯酸鈉溶液處理20 min，用清水漂洗后，用75％酒精再處理1 h，能有效控制污染。15000 rpm條件下?lián)v碎30 s，小孢子的完整率較高，且分離出的小孢子數(shù)較多。采用30％麥芽糖離心純化小孢子效果較好。
　　 4.小孢子培養(yǎng)密度為為1×104個(gè)/ml-2×104個(gè)/ml時(shí)，更有利于小孢子培養(yǎng)。
　　 5.不同品種在一致的條件下進(jìn)行培養(yǎng)，小孢子啟動(dòng)數(shù)與胚狀體大小存在差異，均表現(xiàn)為：煙農(nóng)19<山

4、農(nóng)664<濟(jì)麥20　　 6.小孢子分離方式是決定小孢子培養(yǎng)成功與否的重要因素。組織搗碎法分離的小孢子數(shù)量雖多，但會(huì)產(chǎn)生組織碎片與死亡小孢子，不利于小孢子培養(yǎng)；同時(shí)，搗碎法分離的小孢子會(huì)直接暴露于培養(yǎng)基中，因此對(duì)于培養(yǎng)基的濃度要求十分苛刻。這些不利