甜瓜蔗糖磷酸合成酶基因的功能鑒定與分析.pdf_第1頁
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文檔簡(jiǎn)介

1、甜瓜是一種重要的園藝植物,由于具有良好的口感和豐富的營養(yǎng),因此深受廣大群眾熱愛,并在全國各地廣泛栽培。但是我國甜瓜的品質(zhì)相對(duì)較差,經(jīng)濟(jì)效益不高,我國已經(jīng)加入WTO,甜瓜市場(chǎng)面臨著國際化的競(jìng)爭(zhēng),提高甜瓜品質(zhì)的任務(wù)迫在眉睫。
   含糖量是甜瓜品質(zhì)的重要指標(biāo)之一,它不僅影響甜瓜的口感和著色,還是合成有機(jī)酸、維生素、類胡蘿卜素等營養(yǎng)成分的基礎(chǔ)物質(zhì),因此研究甜瓜糖分積累機(jī)理對(duì)改善甜瓜品質(zhì)具有重要意義。甜瓜中的可溶性糖主要包括蔗糖、果糖、

2、葡萄糖,而成熟甜瓜中60%以上的可溶性糖是蔗糖,因此蔗糖含量的高低決定了甜瓜的品質(zhì)。影響蔗糖代謝的酶主要有蔗糖磷酸合成酶(SPS)、蔗糖合成酶(SS)、酸性轉(zhuǎn)化酶(AI)和中性轉(zhuǎn)化酶(NI),其中SPS活性的提高和AI活性的降低是蔗糖積累的首要條件,改變SPS的活性可能會(huì)改變蔗糖的代謝模式。SPS對(duì)光合產(chǎn)物在蔗糖和淀粉之間的分配具有重要的調(diào)控作用,另外,SPS還參與了植物的光合作用。因此,利用現(xiàn)代分子生物學(xué)的方法改變蔗糖代謝酶的活性對(duì)甜

3、瓜品質(zhì)育種具有重要的意義。本研究在前期工作(克隆SPS基因、構(gòu)建表達(dá)載體、遺傳轉(zhuǎn)化)的基礎(chǔ)上獲得了轉(zhuǎn)反義SPS基因和正義SPS基因的甜瓜株系,并對(duì)其后代進(jìn)行了SPS基因功能的鑒定,為改善甜瓜品質(zhì)奠定了基礎(chǔ)。研究的主要結(jié)果如下:
   1.測(cè)定了轉(zhuǎn)正反義SPS基因的甜瓜植株與對(duì)照不同發(fā)育期的生長(zhǎng)勢(shì),結(jié)果表明,轉(zhuǎn)反義SPS基因的甜瓜株系生長(zhǎng)勢(shì)(包括株高、莖粗、葉面積)明顯變?nèi)酰D(zhuǎn)正義SPS基因的株系生長(zhǎng)勢(shì)均比對(duì)照強(qiáng)。
  

4、 2.對(duì)轉(zhuǎn)正反義SPS基因的甜瓜植株與對(duì)照不同發(fā)育期的凈光合速率進(jìn)行了測(cè)定,結(jié)果表明,轉(zhuǎn)反義SPS基因的株系的凈光合速率均比對(duì)照低,然后對(duì)葉綠體超微結(jié)構(gòu)的觀察發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)基因株系中的葉綠體大部分受到破壞,這可能是造成凈光合速率降低的重要原因;轉(zhuǎn)正義SPS基因的株系中的凈光合速率比對(duì)照高,尤其是T-5株系,通過觀察葉綠體超微結(jié)構(gòu)發(fā)現(xiàn),盡管T-5株系中每個(gè)基粒中的基粒片層數(shù)少于對(duì)照,但T-5株系每個(gè)細(xì)胞中的葉綠體個(gè)數(shù)大于對(duì)照,因此,其光合性能

5、要比對(duì)照強(qiáng)。
   3.對(duì)轉(zhuǎn)基因株系和對(duì)照植株果實(shí)不同發(fā)育期的蔗糖、果糖、葡萄糖及SPS活性進(jìn)行了測(cè)定,結(jié)果表明,轉(zhuǎn)反義SPS基因株系的果實(shí)SPS活性各個(gè)發(fā)育期均低于對(duì)照,而轉(zhuǎn)正義SPS基因株系的果實(shí)SPS活性均高于對(duì)照;此外,轉(zhuǎn)反義SPS基因的果實(shí)蔗糖含量各個(gè)發(fā)育期都有不同程度的降低,而轉(zhuǎn)正義SPS基因的果實(shí)蔗糖含量各個(gè)時(shí)期都高于對(duì)照,成熟果實(shí)中T-5株系的果實(shí)蔗糖含量比對(duì)照提高22%。以上結(jié)果表明SPS活性的高低是蔗糖積累

6、的關(guān)鍵因素和必要前提。
   4. 通過測(cè)定轉(zhuǎn)基因果實(shí)與對(duì)照果實(shí)的發(fā)育速度,結(jié)果表明,與對(duì)照相比,整個(gè)生長(zhǎng)發(fā)育期,轉(zhuǎn)反義基因的果實(shí)生長(zhǎng)較為緩慢,至果實(shí)成熟時(shí),轉(zhuǎn)基因株系T-1和T-2單果重分別比對(duì)照降低25%和18%;轉(zhuǎn)正義基因的果實(shí)生長(zhǎng)較快,尤其是T-5株系,成熟果實(shí)的單果重比對(duì)照提高26.4%。因?yàn)檎崽鞘侵参锷L(zhǎng)發(fā)育的基礎(chǔ)物質(zhì),是許多代謝反應(yīng)的底物,因此可以說明葉片中蔗糖含量的高低影響了甜瓜果實(shí)的生長(zhǎng)發(fā)育。
   5

7、. 通過測(cè)定反義株系與對(duì)照植株葉片中蔗糖/淀粉比率日變化,闡明了SPS在碳水化合物合成方向方面的重要作用。研究結(jié)果表明,SPS活性在對(duì)照及轉(zhuǎn)基因株系葉片中的活性均隨著光強(qiáng)的變化而變化,呈現(xiàn)一個(gè)單峰趨勢(shì),均在12:00時(shí)達(dá)到最大值,葉片中蔗糖含量的變化趨勢(shì)與SPS活性基本一致,而淀粉含量的變化趨勢(shì)是:T-1、T-2株系淀粉含量大體趨勢(shì)一直升高,而對(duì)照葉片中淀粉含量則是前期稍降低后升高的趨勢(shì),因此蔗糖/淀粉比率均呈現(xiàn)先升高后降低的趨勢(shì),而對(duì)

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