![](https://static.zsdocx.com/FlexPaper/FileRoot/2019-3/1/9/145efbbb-27c0-4b9e-bc42-0b5665e72539/145efbbb-27c0-4b9e-bc42-0b5665e72539pic.jpg)
![PRRSV不同素株感染MARC-145細胞的蛋白質組學分析及ZCYZ株感染性克隆的拯救.pdf_第1頁](https://static.zsdocx.com/FlexPaper/FileRoot/2019-3/1/9/145efbbb-27c0-4b9e-bc42-0b5665e72539/145efbbb-27c0-4b9e-bc42-0b5665e725391.gif)
版權說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內容提供方,若內容存在侵權,請進行舉報或認領
文檔簡介
1、豬繁殖與呼吸綜合征(PorcineReproductiveandRespiratorySyndrome,PRRS)是由PRRS病毒(PRRSV)感染所致的一種病毒性傳染病。該病以繁殖障礙、呼吸道疾病、免疫抑制和持續(xù)性感染等為主要特征。在體內,PRRSV主要感染豬肺泡巨噬細胞(Porcinealveolarmacrophages,PAM);在體外,主要感染非洲綠猴腎細胞系MA-104及其衍生物MARC-145細胞。為了深入了解PRRSV感
2、染后宿主細胞的反應以及不同毒株之間致病性的差異,本論文進行了以下研究:
本研究首先對三株PRRSV(SD1株、SX-1株和ZCYZ株)的致病性進行了分析,通過序列比對及動物實驗表明:SD1株為傳統(tǒng)毒株,Nsp2沒有缺失;SX-1株為高致病性毒株,Nsp2缺失30個氨基酸;ZCYZ株為從野豬中分離得到的高致病性毒株,Nsp2缺失了54個氨基酸,毒力介于SD1和SX-1之間。
分別用SD1株、SX-1株和ZCYZ
3、株感染MARC-145細胞,于感染后48h收取細胞樣本,運用iTRAQ技術(同位素相對標記與絕對定量技術)結合質譜鑒定(MALDI-TOFMS/MS)的方法分析不同致病性PRRSV毒株感染MARC-145細胞后相關蛋白表達的差異。結果三組(SD1vsMARC-145;SX-1vsMARC-145;ZCYZvsMARC-145)總共鑒定了233個差異蛋白,這些蛋白可以歸結為與形態(tài)相關,與蛋白的合成及代謝相關,與熱應激反應相關以及與泛素蛋白
4、酶體通路相關。
對鑒定到的差異蛋白進行Pathway分析,篩選出顯著的、準確的、靶向的Pathway(Pathway-Analysis)。基于這些差異表達的蛋白,我們構建了蛋白與蛋白之間的信號轉導網(wǎng)絡,研究蛋白間的信號轉導過程,并從網(wǎng)絡中找到起信號中樞的核心蛋白(Signal-Net),而后對這三組數(shù)據(jù)中都存在的差異蛋白HSPA8的上調和ANXA2的下調用Western-blot的方法進行了驗證。
PRRSV
5、ZCYZ株分離自我國雜交的野豬群,該品種擁有75%的野豬血統(tǒng)和25%的杜洛克家豬血統(tǒng)。雜交的野豬能夠穩(wěn)定遺傳并在外型上保留了野豬的特征。除此之外,它們脂肪含量較低,對外周環(huán)境有較強的適應能力。為了進一步闡述ZCYZ株的遺傳特征及Nsp2處缺失的54個氨基酸對病毒致病力的影響,我們對其全基因進行了測序分析,并構建了感染性cDNA克隆。間接免疫熒光實驗證實了感染性克隆被成功拯救。動物實驗表明拯救的克隆化病毒相對于母本毒株毒力與致病力而言較弱
溫馨提示
- 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
- 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請聯(lián)系上傳者。文件的所有權益歸上傳用戶所有。
- 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁內容里面會有圖紙預覽,若沒有圖紙預覽就沒有圖紙。
- 4. 未經(jīng)權益所有人同意不得將文件中的內容挪作商業(yè)或盈利用途。
- 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲空間,僅對用戶上傳內容的表現(xiàn)方式做保護處理,對用戶上傳分享的文檔內容本身不做任何修改或編輯,并不能對任何下載內容負責。
- 6. 下載文件中如有侵權或不適當內容,請與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
- 7. 本站不保證下載資源的準確性、安全性和完整性, 同時也不承擔用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。
最新文檔
- 基于SILAC技術的PRRSV感染Marc-145細胞分泌蛋白質組學研究.pdf
- PRRSV HuN4-F112與Henan-A11-376株對MARC-145細胞感染性差異的研究.pdf
- 三株PRRSV的生物學特性、全基因組測序及PRRSV-JSyx-2006株全長感染性克隆的構建.pdf
- 非肌肉肌球蛋白Ⅱ型重鏈A蛋白羧基端在PRRSV感染Marc-145細胞中的作用.pdf
- Marc-145細胞周期同步化及PRRSV細胞受體表達與病毒感染的關系.pdf
- 豬溫兔化弱毒標記株感染性克隆的構建與病毒拯救.pdf
- Ⅰ:肝癌細胞株與正常肝細胞株的差異蛋白質組學研究 Ⅱ:運用SELDI蛋白質芯片技術檢測Vero細胞感染HSV-1后蛋白質的差異表達.pdf
- PRRSV HuN4株和CH-1a株感染性克隆及其嵌合病毒的構建及其初步應用.pdf
- 豬Ⅱ型圓環(huán)病毒浙江分離株的全基因組克隆及感染性克隆的構建.pdf
- 7型腺病毒溫州株基因組主要序列分析及感染性克隆構建.pdf
- 表達綠色熒光蛋白的北美Ⅱ型PRRSV感染性克隆的制備及特性分析.pdf
- 弓形蟲不同發(fā)育期、不同蟲株卵囊比較蛋白質組及不同蟲株速殖子比較修飾蛋白質組的研究.pdf
- 人工microRNAs在MARC-145細胞中抑制高致病性PRRSV的初步研究.pdf
- 豬瘟病毒高感染性PK-15細胞單克隆細胞株的篩選.pdf
- 豬繁殖與呼吸綜合征病毒HB-XL株感染性cDNA克隆的構建及病毒拯救.pdf
- 54260.csfv石門株基因組感染性克隆的構建與致細胞病變分子機制研究
- 豬圓環(huán)病毒2型山東株遺傳演化分析及SD1株感染性分子克隆的構建.pdf
- 鴨星狀病毒1型D51株DNA-launched感染性克隆的構建與病毒拯救.pdf
- JEV PrM-M蛋白單克隆抗體的制備及JEV P3感染U251細胞蛋白質組學分析.pdf
- Jiv蛋白對豬瘟病毒復制的作用及豬瘟病毒C株感染性克隆的構建.pdf
評論
0/150
提交評論