水稻OsMPK14基因的克隆及其特征分析.pdf_第1頁
已閱讀1頁,還剩65頁未讀, 繼續(xù)免費閱讀

下載本文檔

版權說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權,請進行舉報或認領

文檔簡介

1、促分裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)是在真核生物中普遍存在的一類絲氨酸/蘇氨酸(Ser/Thr)蛋白激酶,是MAPK級聯(lián)通路的重要組分。有研究顯示,MAPK參與了生物及非生物脅迫應答、激素反應、細胞分化的調控和發(fā)育過程。
   本實驗室通過cDNA文庫篩選的方法,從水稻幼穗中克隆了潛在的OsMPK14基因的cDNA片段-OsRP19(GenBank登錄號為FJ9196

2、00)。本研究進一步通過序列比對拼接,結合RT-PCR方法克隆了該基因長度為1660bp的cDNA序列(GeneBank登錄號為GO265780),其中包含1629bp的ORF,編碼542個氨基酸。蛋白保守結構域分析提示,第12~304位氨基酸對應一個典型的絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶結構域。cDNA序列在水稻基因組數(shù)據(jù)庫檢索結果顯示,該基因位于水稻第5號染色體上,編碼區(qū)由9個外顯子和8個內(nèi)含子組成。系統(tǒng)進化分析顯示,OsMPK14屬于水稻M

3、APK家族的E組。
   采用半定量RT-PCR分析OsMPK14表達模式,結果顯示OsMPK14在水稻幼苗的根和地上部分均有表達,不具有明顯的組織特異性,說明水稻OsMPK14可能在多種組織中發(fā)揮作用。分別以鹽脅迫、ABA、低溫、干旱和光照處理水稻根和地上部分,半定量RT-PCR結果顯示,OsMPK14可能參與了水稻對鹽害和低溫的脅迫應答,并且處于激素ABA的調控之下,且OsMPK14在水稻地上部分的表達可能受光照的負調控,而

4、在根中的表達則受到光的正調控。
   采用RNA原位雜交分析OsMPK14在水稻葉片和幼穗中的分布,結果表明OsMPK14主要分布在葉片的葉肉細胞中,并在雌雄蕊形成期的水稻幼穗中廣泛分布,OsMPK14轉錄本的分布特點提示,該基因與水稻的生長發(fā)育關系密切。
   構建了OsMPK14的原核表達載體pET28(a)-OsMPK14,并在大腸桿菌中誘導表達出與組氨酸標簽融合的OsMPK14蛋白,為進一步制備抗體,研究OsMP

溫馨提示

  • 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
  • 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請聯(lián)系上傳者。文件的所有權益歸上傳用戶所有。
  • 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁內(nèi)容里面會有圖紙預覽,若沒有圖紙預覽就沒有圖紙。
  • 4. 未經(jīng)權益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
  • 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲空間,僅對用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護處理,對用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對任何下載內(nèi)容負責。
  • 6. 下載文件中如有侵權或不適當內(nèi)容,請與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
  • 7. 本站不保證下載資源的準確性、安全性和完整性, 同時也不承擔用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。

評論

0/150

提交評論