1、害蟲防治是農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中的一項重要的任務(wù)，蘇云金芽胞桿菌(Bacillus thuringiensis)作為一種與環(huán)境友好的微生物殺蟲劑，具有巨大的應(yīng)用前景，在綠色植保中扮演了重要的角色。除用作殺蟲劑之外，Bt殺蟲基因還被應(yīng)用于轉(zhuǎn)基因抗蟲作物的開發(fā)。目前，cry1A基因的抗蟲棉花在中國已經(jīng)得到廣泛的種植，有效的解決了棉鈴蟲對棉花生產(chǎn)的危害。但是隨著轉(zhuǎn)基因抗蟲作物的大面積種植，害蟲的抗藥性上升風(fēng)險不斷增大，向害蟲防治提出了新的挑戰(zhàn)。
　

2、　 本文以篩選可用于殺蟲劑開發(fā)與應(yīng)用的具有高活性并且與cry1A類基因無交互抗性的菌株為目的，依據(jù)與cry1A類無交互抗性的cry基因序列，通過聚類分析已知與cry1A類基因無交互抗性的的基因設(shè)計了8對鑒定引物，通過PCR的方法鑒定了實驗室保存的192株對鱗翅目具有高毒力的菌株，鑒定出了15株對鱗翅目具有高毒力的的菌株。對這15株菌株進(jìn)行質(zhì)粒圖譜分析，這15株菌株可分成8種類型，對其基因型鑒定，包含的基因類型有：cry1B、cry1C

3、、cry1D、cry1I、cry2A和cry9類基因；電鏡觀察晶體形態(tài)包含：雙錐體形、方形、球形；SDS-PAGE分析其中一株既表達(dá)130 ku的蛋白又表達(dá)60ku左右的蛋白，一株同時表達(dá)130 ku和70 ku左右的蛋白，其余菌株均表達(dá)130 ku左右的蛋白并對胞晶混合物中的晶體蛋白含量進(jìn)行定量分析。選取了目前生產(chǎn)菌株KN11為對照，對這8株菌株進(jìn)行了甜菜夜蛾、小菜蛾、敏感棉鈴蟲、Cry1Ac抗性棉鈴蟲的的生物活性測定。這8株菌株對小

4、菜蛾均表現(xiàn)出較高的殺蟲活性，其中菌株P(guān)S4-E12對小菜蛾的殺蟲活性要比對照菌株KN11高近4倍；3株菌對甜菜夜蛾幼蟲具有高毒力，其中菌株P(guān)S3-C2對甜菜夜蛾LC50值為1.87μg·mL-1；對敏感棉鈴蟲具有高毒力的菌株4株(PS4-E12、PS1-F11、SCL-B3、PS8-B6)；初步篩選出對cry1Ac抗性棉鈴蟲無交互抗性的菌株6株(PS3-C2、PS1-F11、SCL-B3、PS8-B6、PS4-E12、MO3-E5)，但