1、為尋找新的殺蟲毒素資源,開發(fā)新的殺蟲毒素基因,該研究自九個(gè)昆蟲病原線蟲品系中分離共生菌菌株80株,用生物測(cè)定方法對(duì)共生菌菌株的殺蟲活性進(jìn)行評(píng)價(jià),從中篩選高毒力菌株,研究其殺蟲活性物質(zhì),初步開展了共生菌殺蟲毒素的純化工作,主要結(jié)論如下:以玉米螟為供試?yán)ハx,對(duì)80個(gè)菌株進(jìn)行了胃毒毒力和體重抑制率的測(cè)定,從中篩選出A24-6R、A24-1B和A24-19B三個(gè)菌株為高毒力菌株,進(jìn)一步進(jìn)行殺蟲活性物質(zhì)研究.在血腔毒力測(cè)定中,三個(gè)高毒力菌株在10

2、cell/μl的菌液濃度下僅需10μl 48h內(nèi)就能使大蠟螟老熟幼蟲在全部死亡.高毒力菌株中A24-1B為長(zhǎng)桿形細(xì)菌,A24-6R為短桿形細(xì)菌.在對(duì)三個(gè)高毒力菌株相關(guān)影響因子的研究中表明,三個(gè)高毒力菌株經(jīng)高溫50℃處理10min后,殺蟲活性均有所降低,但對(duì)玉米螟幼蟲仍有較高的體重抑制率;經(jīng)高溫100℃處理10min后,三菌株均喪失了殺蟲活性,對(duì)玉米螟幼蟲體重抑制率較低;三個(gè)高毒力菌株在1 8W紫外燈照射下,隨著照射時(shí)間的延長(zhǎng),對(duì)玉米螟的

3、殺蟲死亡率和校正死亡率都呈逐漸下降的趨勢(shì),在紫外照射120min時(shí),完全喪失殺蟲活性.通過(guò)對(duì)三個(gè)高毒力菌株生長(zhǎng)曲線的測(cè)定,可知Ⅱ型菌A24-6R比Ⅰ型菌A24-1B和A24-19B的繁殖速度快.以A24-19B為供試菌株,研究不同培養(yǎng)時(shí)間對(duì)高毒力菌株殺蟲活性的影響,結(jié)果表明A24-19B菌株發(fā)酵液對(duì)玉米螟的殺蟲校正死亡率和體重抑制率隨著培養(yǎng)時(shí)間的延長(zhǎng)呈波浪形升高趨勢(shì).A24-19B的發(fā)酵液對(duì)玉米螟初孵幼蟲的LC<,50>為7.46×10

4、<'9>cell/ml.測(cè)定了三個(gè)高毒力菌株對(duì)小菜蛾(Plutella xylostella)、甜菜夜蛾(Spodoptera exigua)、粘蟲(Mythimna separata)、黃粉蟲(Tenebrio molitor)幼蟲的胃毒毒力,結(jié)果表明,除黃粉蟲外,對(duì)其余三種供試鱗翅目昆蟲幼蟲均表現(xiàn)較高的胃毒毒力,具有較廣泛的殺蟲譜.提取了三個(gè)共生菌高毒力菌株的殺蟲活性物質(zhì),并初步進(jìn)行了純化,得到殺蟲毒素粗提物,在提純過(guò)程中,殺蟲活性