鴨瘟的動(dòng)態(tài)病理學(xué)研究和鴨CD4的克隆.pdf_第1頁
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1、鴨瘟(Duck plague, DP)又名鴨病毒性腸炎(Duck viral enteritis, DVE),是鴨、鵝和其他雁形目禽類的一種急性敗血性、接觸性傳染病,其發(fā)病率和死亡率都非常高,給全世界養(yǎng)鴨業(yè)帶來了巨大的經(jīng)濟(jì)損失。
   本試驗(yàn)將108羽35日齡櫻桃谷鴨隨機(jī)分為兩組:對(duì)照組36羽,試驗(yàn)組72羽,分別隔離飼養(yǎng),試驗(yàn)組每羽腿部肌肉注射0.1mL病毒液,復(fù)制鴨瘟病理模型。對(duì)所建立的病理模型進(jìn)行臨床癥狀觀察、病理組織學(xué)檢查

2、、超微結(jié)構(gòu)變化觀察,同時(shí)對(duì)11項(xiàng)血清生理生化指標(biāo)ALT、AST、ALT/AST、LD、AMY、ALB、GLB、TP、A/G、ALP、CK及皮質(zhì)醇(Cor)、腫瘤壞死因子α(TNF-α)兩項(xiàng)細(xì)胞因子等方法對(duì)所建立的病理模型進(jìn)行動(dòng)態(tài)變化。本研究同時(shí)克隆出櫻桃谷鴨和麻鴨CD4ORF基因序列,并對(duì)其進(jìn)行分析,為進(jìn)一步研究CD4+T淋巴細(xì)胞在闡明禽類疫病的免疫機(jī)理奠定基礎(chǔ)。
   人工感染鴨瘟病毒的試驗(yàn)鴨臨床癥狀表現(xiàn)為:感染后4d病鴨食欲

3、減退,發(fā)生頑固性下痢,糞便呈綠色或灰白色,泄殖腔紅腫,肛門外翻,病鴨眼角流出澄清透明的漿液性分泌物,眼周圍呈現(xiàn)“淚斑”,鼻腔流出稀薄或黏稠的分泌物,呼吸困難,并開始出現(xiàn)死亡;感染5d后有的鴨頭頸腫大,死亡率為48.6%。
   對(duì)人工感染鴨瘟病毒的試驗(yàn)鴨外周血生理生化指標(biāo)的測(cè)定結(jié)果表明,病毒感染對(duì)外周血各項(xiàng)指標(biāo)都有一定的影響,在感染后,感染組鴨血清中ALT、AST、LD、AMY的含量始終明顯高于對(duì)照組;感染組鴨血清中ALT/AS

4、T、ALB、GLB、TP、A/G含量始終低于對(duì)照組;ALP、CK含量感染組較對(duì)照組比較先升高后下降;而TNF-α和Cor無明顯差異。
   感染組鴨的組織學(xué)檢查結(jié)果為:肝臟在感染初期肝細(xì)胞發(fā)生水泡變性、脂肪變性,感染后3d組織出現(xiàn)壞死,后期壞死進(jìn)一步加劇;感染后黏膜上皮變薄甚至消失,隨著病情的發(fā)展,組織發(fā)生充血、出血、壞死;腸道感染后2d肌層出現(xiàn)淋巴濾泡,5d時(shí)淋巴濾泡細(xì)胞數(shù)量減少,并在出現(xiàn)淋巴濾泡的地方發(fā)生出血、壞死;腎臟在感

5、染后腎小管上皮細(xì)胞發(fā)生壞死,有的上皮細(xì)胞從基底膜脫落到管腔中,感染后期組織充血、出血,并伴有炎性細(xì)胞浸潤(rùn);胰腺在感染后4d組織發(fā)生壞死,且隨著病情的發(fā)展,壞死面積逐漸增大;動(dòng)物感染后心肌的變化不十分明顯,在感染后3d出現(xiàn)了少量的出血現(xiàn)象,并在感染后4d發(fā)生心內(nèi)膜出血;脾臟、胸腺、法氏囊均在感染后出現(xiàn)淋巴細(xì)胞數(shù)量減少的現(xiàn)象,同時(shí)在感染后期,組織發(fā)生壞死。
   脾臟、胸腺超微結(jié)構(gòu)觀察結(jié)果:感染1d后,在感染鴨脾臟中觀察到吞噬了異物

6、的巨噬細(xì)胞,感染后2d內(nèi)質(zhì)網(wǎng)有的發(fā)生擴(kuò)張,后期發(fā)現(xiàn)多個(gè)壞死的細(xì)胞,并在感染5d時(shí)觀察到吞噬了壞死細(xì)胞的巨噬細(xì)胞;感染1d后,即在感染鴨胸腺胞質(zhì)內(nèi)發(fā)現(xiàn)病毒顆粒,感染后3d觀察到異嗜性粒細(xì)胞正在伸出偽足吞噬壞死細(xì)胞殘留的碎片,后期壞死細(xì)胞增多,并在細(xì)胞內(nèi)、外均發(fā)現(xiàn)了病毒顆粒的存在。
   根據(jù)GeneBank中收錄的北京鴨CD4基因序列(AF378701)設(shè)計(jì)合成一對(duì)特異性引物,分別對(duì)櫻桃谷鴨和麻鴨CD4ORF基因進(jìn)行擴(kuò)增,并測(cè)定其

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