1、本研究以春劍‘翠仙’花梗為外植體，采用不同的處理，在不同的時間段內(nèi)測定PPO活性、POD活性以及總酚含量的變化，研究它們在組培過程中與褐化的關(guān)系，初步探索褐化機理，為控制春劍花梗離體培養(yǎng)褐化問題奠定基礎(chǔ)。主要研究結(jié)果如下：
　　 1)春劍花梗離體培養(yǎng)的最佳取材時機為2月份，褐化率最低為20％;外植體的PPO活性在接種后第7天達到第一個峰值，之后活性下降，在接種后第21天時達到第二個峰值，兩峰值間相差3個酶活力單位。
　　

2、 2)經(jīng)過暗培養(yǎng)的外植體褐化率最低，比對照低15個百分點，二者間差異達到極顯著水平。
　　 3)用3g/L的抗壞血酸或檸檬酸溶液浸泡外植體后，褐化率均為20％,與最高褐化率相差50個百分點。其中，抗壞血酸的防褐效果最好，二者在褐化率最低處理中同期比較相差5個百分點。
　　 4)在培養(yǎng)基中添加抗氧化劑或吸附劑時，外植體的PPO活性、POD活性變化趨勢不一致；酶活性并未隨著時間延長而持續(xù)增加或者減少。抗氧化劑添加方面，檸檬酸

3、濃度和抗壞血酸濃度均為2g/L時，其褐化率最低，分別為35％和30％;PPO活性也最低，在活性分別達到第一個峰值時不同濃度處理同期比較，檸檬酸和抗壞血酸分別相差0.2和0.5個酶活性單位；同時，POD活性也是最低值，在第一個峰值處不同處理同期比較，分別相差15和12個酶活性單位。
　　 5)切口封閉溫度不同，外植體的褐化率、酶活性差異較大，隨著切口封閉溫度升高(45℃，65℃，85℃)，褐化率、酶活性逐漸降低。當切口溫度為45℃

4、，外植體褐化率最低，到接種第28天時褐化率為零；此時PPO活性、POD活性最高，與褐化率最高處理相比，PPO活性相差近2個酶活力單位，POD相差近15個酶活力單位。而總酚含量并未隨著溫度的升高而出現(xiàn)明顯的差異。
　　 6)當基本培養(yǎng)基為1/4MS時，外植體的褐化率最低，為15％;當基本培養(yǎng)基為MS時，外植體的褐化率最高，為35％。說明含有低無機鹽和低氨態(tài)氮的培養(yǎng)基可以減輕外植體的褐化。此外，培養(yǎng)基中較高的細胞分裂素與生長素的比例