1、,,,肺癌常用免疫組化標記物初識,,,,,,寧波二院 呼吸科鄒俊勇,,目錄,CONTENTS,PART,,,,,,1,肺腺癌的常用標記物,1 TTF-1(thyroid transcription factor-1,TTF-1) 甲狀腺轉(zhuǎn)錄因子-1,,1.TTF-1 是肺腺癌最常用的免疫標志物之一,80%肺腺癌（+）2.與腫瘤分化程度正相關(guān),分化越差則越可能表達缺失,具有Ⅱ型肺泡上皮細胞/Calar 細胞特征的腺癌

2、近100%陽性3.鱗癌通常不表達TTF-14.TTF-1 也表達于肺神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤，包括類癌、50% 的大細胞神經(jīng)內(nèi)分泌癌及 90% 的小細胞肺癌5.轉(zhuǎn)移性肺癌中,除了甲狀腺癌近100%陽性,少量子宮內(nèi)膜、子宮頸、卵巢、乳腺和結(jié)直腸的腺癌也表達，但所有類型腎細胞癌均不表達,2 Napsin A (novel aspartie proteinase A 新天冬氨酸蛋白酶A),,1.80% 的肺腺癌表達 Napsin A2.與T

3、TF-1相似,Napsin A 在肺腺癌中表達也與組織學類型、分化程度具有相關(guān)性3.3%肺鱗癌表達 Napsin A4.肺神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤不表達Napsin A5.部分轉(zhuǎn)移性肺癌，如腎細胞癌、少部分甲狀腺乳頭狀癌、子宮內(nèi)膜癌、膽管細胞癌等,TTF-1 和 Napsin A 是目前診斷肺腺癌最優(yōu)秀的抗體組合之一,3 肺腺癌其它常用免疫組化標記物,,CK7（cytokeratin-7）、細胞角蛋白71.敏感性高，近100%肺腺癌表

4、達2.特異性差，>30%肺鱗癌陽性,表達廣泛見于乳腺、胃、卵巢、胰腺、子宮、尿路上皮等多種器官和部位發(fā)生的腺癌3.轉(zhuǎn)移性結(jié)直腸腺癌常陰性,肺泡表面糖蛋白( SP-A、SP-B) 1.主要見于具有Ⅱ型肺泡上皮細胞/ Calar 細胞分化特征的腺癌（分化較好）2.在差分化肺腺癌常常表達缺失,例如起源于較大支氣管、具有杯狀細胞特征的腺癌(浸潤性黏液腺癌、膠樣腺癌等),Cam5.2(CK8和CK18)1.100% 的肺腺癌陽

5、性2.約 35% 的肺鱗癌和 20%大細胞肺癌陽性3.其他器官腺癌也幾乎均表達,PART,,,,,,2,肺鱗癌的常用標記物,1 p63與p40,,1.敏感性同p63，鱗癌96.8%陽性2.特異性高于p63，腺癌3%陽性，且常局灶表達3.內(nèi)分泌腫瘤中，類癌不表達，大細胞肺癌3.6%4.間皮瘤2.4%,1.> 90% 的肺鱗癌 p63 呈強烈核表達，必須為彌漫性表達2. 在肺腺癌中的陽性率為10% ~ 33%，常為局灶性

6、3.在內(nèi)分泌肺癌中：類癌<6%,大細胞肺癌15%，小細胞肺癌22%,p63,p40,2 DSG1 橋粒芯蛋白抗體-1 與CK5/6,,,,1,2,3,1.85% ~ 90% 的肺鱗癌表達 DSG3,2.幾乎不表達于肺腺癌(﹤2% ),,1.75% ~ 100% 的肺鱗癌表達 CK5 / 6,其表達與鱗癌的分化、分級無關(guān)2.2% ~ 33% 的肺腺癌可表達 CK5 / 6,但常呈局灶性低水平表達。3.75% ~ 100% 的

7、胸膜上皮樣惡性間皮瘤也表達,,,DSG1,CK5/6,PART,,,,,,3,神經(jīng)內(nèi)分泌癌的常用標記,1 CgA、Syn 和CD56,,1,2,3,4,Syn（突觸素）：一種突出囊泡膜蛋白，在所有正常的和腫瘤的神經(jīng)內(nèi)分泌細胞中均可出現(xiàn)，在神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤中廣泛表達。,肺內(nèi)分泌性腫瘤 包括典型類癌，非典型類癌、大細胞癌及小細胞癌， 主要依靠形態(tài)學特征,而大細胞癌 的診斷則常需要結(jié)合免疫標志物。CgA（嗜鉻素A）、Syn（突觸素） 和CD5

8、6 是最常用的神經(jīng)內(nèi)分泌標志物組合,CD56是一種神經(jīng)細胞黏附分子和NK細胞的標志物，神經(jīng)內(nèi)分泌組織及其腫瘤和少數(shù)淋巴瘤呈強陽性反應(yīng)。注:CD(cluster of differentiation),用單克隆抗體法鑒定來自不同實驗室的同一的白細胞分化抗原。,CgA（嗜鉻素A）：一種位于基質(zhì)中的大分泌顆粒的蛋白，在腫瘤細胞的胞漿中呈不均勻表達甚至不表達，在大多數(shù)具有大量分泌顆粒的分化良好的神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤中呈強陽性,2 Ki-67（增殖

9、指數(shù)）,,1.Ki67是一種增殖細胞相關(guān)的核抗原,其功能與有絲分裂密切相關(guān),在細胞增殖中是不可缺少 。2.Ki67標記的是處于增殖周期中的細胞。該標記陽性率越高，腫瘤生長越快，組織分化越差，對化療也越敏感。3.Ki-67 對肺神經(jīng)內(nèi)分泌癌具有診斷和分級雙重作用。如典型類癌 的 Ki-67 增殖指數(shù)≤5% ,屬于低級別 ,非典型類癌 為 5% ~ 20% ,屬于中級別 ，大細胞肺癌通?！?0% ,屬于高級別。,,PART,,,,,,4

10、,標記物的組合應(yīng)用,1 肺鱗癌與肺腺癌的鑒別,,,1.TTF-1、Napsin A、CK5/6 和p63(p40)是目前鑒別肺腺癌和鱗癌最常用的抗體組合.2.通常 TTF-1 / p63 組合在腺癌和鱗癌均一陽一陰,如果 TTF-1 / p63 均陽性,傾向于診斷腺癌,因為 p63 可以在腺癌中表達而 TTF-1 幾乎不在鱗癌中彌漫表達;如果TTF-1 / p63 均陰性,則仍然懷疑腺癌,因為 TTF-1 在差分化腺癌中缺失表達

11、的現(xiàn)象較常見,而 p63 在鱗癌中的表達非常穩(wěn)定3.所有鱗癌標志物均不能鑒別轉(zhuǎn)移性鱗癌、上皮癌甚至包括肉瘤和大細胞淋巴瘤(p63可陽性）。 而 p40 在上述大細胞淋巴瘤中不表達,因此選擇 p40 代替 p63 能有效避免將肺或縱隔的大細胞淋巴瘤誤診為鱗癌,,2 肺腺癌與轉(zhuǎn)移性腺癌鑒別,,GATA-3 是乳腺癌的特異性標志物Pax-8、ER 和 PR 表達則支持卵巢漿液性腺癌的診斷;Pax-8、TG 表達有助于甲狀腺癌的診斷;

12、PAS 和 PASP 表達則強烈支持前列腺癌的診斷。,肺腺癌常常需要與轉(zhuǎn)移性結(jié)直腸腺癌鑒別,對于大部分肺腺癌,利用肺腺癌特異性的標志物如 CK7、TTF-1 和 Napsin A,以及腸癌特異性標志物如 CK20、CDX2 等易與轉(zhuǎn)移性結(jié)直腸癌鑒別診斷。,鱗癌可能來自食管、頭頸部、皮膚等部位,其他還包括膀胱等泌尿系統(tǒng)的尿路上皮癌。 目前尚無有效的標志物(組合)將肺原發(fā)性鱗癌與轉(zhuǎn)移性鱗癌鑒別。,腺癌可能來自胃腸道、乳腺、卵巢、子宮內(nèi)

13、膜和前列腺等器官,未知原發(fā)部位的轉(zhuǎn)移性腺癌占所有肺癌的 3% ~ 5% 。一些腺癌轉(zhuǎn)移至肺臟時仍然表達“器官特異性”的標志物,借助有效的抗體組合可以進行鑒別診斷。,3 肺癌與胸膜間皮瘤鑒別,,缺乏100% 的特異性標志物,因此應(yīng)至少選擇 2 個間皮和 2 個上皮標志物。根據(jù)抗體的敏感度和特異度,間皮瘤最好的標記為鈣視網(wǎng)膜蛋白(Calretinin)、CK5 或CK5/6、Wilms 腫瘤基因 1(Wilms tumour gene-

14、1, WT-1)和 D2-40,肺腺癌最特異性的標志物是 TTF-1 和 Napsin A,p63/p40、DSG3 是肺鱗癌的特異性標志物,,4 大細胞肺癌的鑒別,,,1.根據(jù)定義,大細胞肺癌是一類排他性診斷,指的是除外小細胞癌、腺癌和鱗癌之后的排除性診斷。2.利用抗體組合包括腺癌標志物(如 TTF-1、Napsin A、CK7)、鱗癌標志物(如 p40、p63、CK5/ 6、DSG-3)和神經(jīng)內(nèi)分泌標志物(如 CgA、Syn、