1、春化階段是小麥生長發(fā)育進程中一個及其關鍵的時期。本研究從不同春化發(fā)育特性小麥遼春10和京841春化響應轉(zhuǎn)錄組Illumina高通量測序結(jié)果中，篩選出2個強烈上調(diào)的ESTs CL13519、Unigene1312和2個下調(diào)ESTs Unigene4460、Unigene20。以春性小麥遼春10和冬性小麥京841為材料，系統(tǒng)分析了4個候選ESTs在轉(zhuǎn)錄水平的序列差異及春化處理過程中的表達特性，利用病毒誘導的基因沉默技術進行基因功能驗證；構建

2、CL13519過表達載體，利用農(nóng)桿菌介導法將重組載體導入擬南芥中，分析轉(zhuǎn)基因材料的生長發(fā)育特性。主要研究結(jié)果如下：
　　1、以春性品種遼春10號和冬性品種京841為材料，克隆并分析4個ESTs的序列差異。結(jié)果顯示：CL13519長1010bp，ORF長681bp，編碼226個氨基酸，與TaHOX1（GenBank:JQ915062.1）相似度87.49％；Unigene1312長度為479bp，ORF全長282bp，5′UTR16

3、9bp，3′UTR26bp，編碼93個氨基酸，與硬質(zhì)四倍體小麥脫水素（GenBank:X78432.1）一致性高達85%；Unigene4460長361bp，經(jīng)TAIR在線分析，可能與H3蛋白甲基化相關；Unigene20長632bp，與中國春3B染色體上一段序列（GenBank:HG670306.1）相似度高達83.91%，與山羊草hypothetical protein F775_32582序列（GenBank:KD510223.1

4、）相似度達77.15%。
　　2、利用實時熒光定量PCR分析了4個ESTs在不同春化特性小麥中的表達特性，結(jié)果表明：CL13519、Unigene1312在遼春10號中表達量呈拋物線型表達，第5周時表達量達到最大值；Unigene1312在京841中的表達量呈拋物線型表達，第5周時表達量達到最大值；CL13519在京841中表達模式中有兩個峰值，最大值出現(xiàn)在春化處理第五周；Unigene4460在遼春10號中表達量呈波動式下調(diào)表達

5、；Unigene4460在京841中第1周急劇升高后急劇下降之后一直下調(diào)表達；Unigene20在遼春10號和京841中均呈波浪型表達，在第5周時表達量最低。
　　3、以遼春10號為試驗材料，利用病毒誘導的基因沉默技術（VIGS），成功構建了小麥VIGS基因功能驗證的技術體系，并對所挑選的4個ESTs進行驗證分析。結(jié)果顯示：BSMV的侵染對小麥植株幼穗的分化進程產(chǎn)生了一定的影響。本試驗中空白對照組、陰性對照組、陽性對照組之間小麥幼