1、項(xiàng)目名稱：血管發(fā)育和穩(wěn)態(tài)維持的遺傳及表觀遺傳血管發(fā)育和穩(wěn)態(tài)維持的遺傳及表觀遺傳機(jī)制機(jī)制首席科學(xué)家：楊曉楊曉中國(guó)人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院中國(guó)人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院起止年限：2012.12012.1至2016.82016.8依托部門：總后勤部衛(wèi)生部總后勤部衛(wèi)生部中特定時(shí)期可能存在的甲基化酶或去甲基化酶，克隆得到這些基因，通過(guò)體外合成mRNA后進(jìn)行注射以驗(yàn)證這些基因在血管發(fā)生過(guò)程中的作用。通過(guò)構(gòu)建表達(dá)甲基化酶或者去甲基化酶的轉(zhuǎn)基因魚，結(jié)合體

2、外生化實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證這些甲基化酶或者去甲基化酶在血管形成不同時(shí)期的生理功能。此外，通過(guò)轉(zhuǎn)基因方法在血管內(nèi)皮細(xì)胞中特異性表達(dá)綠色或紅色熒光蛋白（GFP或RFP），結(jié)合長(zhǎng)時(shí)間在體雙光子或共聚焦顯微鏡成像技術(shù)，實(shí)時(shí)記錄和跟蹤中腦內(nèi)的所有血管的三維形態(tài)變化。進(jìn)而，運(yùn)用圖像分析、流體力學(xué)模型分析、細(xì)胞生物學(xué)、分子生物學(xué)等手段，研究腦血管網(wǎng)絡(luò)發(fā)生和發(fā)育的宏觀規(guī)律和分子機(jī)制。2、探討血管內(nèi)皮細(xì)胞特化和定向分化的分子基礎(chǔ)。利用多種特異性標(biāo)記血管系統(tǒng)的轉(zhuǎn)基因魚

3、和大規(guī)模誘變技術(shù)篩選影響血管發(fā)生和造血系統(tǒng)的突變體，通過(guò)共聚焦顯微鏡進(jìn)行實(shí)時(shí)觀察并比較野生型與突變體中血管發(fā)生和造血過(guò)程的差異，研究血液血管母細(xì)胞分化成血管內(nèi)皮細(xì)胞和血細(xì)胞的譜系關(guān)系及其調(diào)控網(wǎng)絡(luò)。同時(shí)，結(jié)合內(nèi)皮細(xì)胞特異性基因敲除技術(shù)，研究主動(dòng)脈腹側(cè)內(nèi)皮細(xì)胞定向分化為造血干細(xì)胞的分子調(diào)控機(jī)理。此外，尋找高等哺乳動(dòng)物小鼠的冠脈內(nèi)皮細(xì)胞起源，利用CreLoxP技術(shù)揭示Notch信號(hào)通路調(diào)控冠脈發(fā)生以及內(nèi)皮細(xì)胞生物學(xué)活性的分子機(jī)制，闡明心外膜促

4、進(jìn)冠脈發(fā)生的重要生理功能和機(jī)制。3、在重要信號(hào)通路影響血管重塑的遺傳和表觀遺傳機(jī)制研究方面，主要利用基于CreLoxP系統(tǒng)的小鼠組織特異性條件基因敲除技術(shù)，構(gòu)建血管內(nèi)皮細(xì)胞、血管平滑肌細(xì)胞、腦血管內(nèi)皮細(xì)胞特異性基因敲除小鼠，深入研究不同類型心血管細(xì)胞如何對(duì)來(lái)自自身和環(huán)境的TGF?和VEGF信號(hào)做出精確反應(yīng)，以及這種反應(yīng)性異常如何導(dǎo)致血管重塑異常以及心血管疾病的發(fā)生。同時(shí)篩選受TGF?調(diào)控的miRNA，并對(duì)這些miRNA調(diào)節(jié)內(nèi)皮細(xì)胞功能、