1、關(guān)于學(xué)位論文原創(chuàng)性和使用授權(quán)的聲明本人所呈交的學(xué)位論文，是在導(dǎo)師指導(dǎo)下，獨(dú)立進(jìn)行科學(xué)研究所取得的成果。對(duì)在論文研究期間給予指導(dǎo)、幫助和做出重要貢獻(xiàn)的個(gè)人或集體，均在文中明確說明。本聲明的法律責(zé)任由本人承擔(dān)。本人完全了解山東農(nóng)業(yè)大學(xué)有關(guān)保留和使用學(xué)位論文的規(guī)定，同意學(xué)校保留和按要求向國家有關(guān)部門或機(jī)構(gòu)送交論文紙質(zhì)本和電子版，允許論文被查閱和借閱。本人授權(quán)山東農(nóng)業(yè)大學(xué)可以將本學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫進(jìn)行檢索，可以采用影印、縮印

2、或其他復(fù)制手段保存論文和匯編本學(xué)位論文，同時(shí)授權(quán)中國科學(xué)技術(shù)信息研究所將本學(xué)位論文收錄到《中國學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫》并向社會(huì)公眾提供信息服務(wù)。保密論文在解密后應(yīng)遵守此規(guī)定。論文作者簽名：導(dǎo)師簽名： 盯叩公日 期：冱蝤6 司帥、立弘一 受雅2 ．2 培養(yǎng)基????????????????????????????????l 12 ．3 常規(guī)分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)????????????????????????1 32 ．3 ．1P C R 反應(yīng)?

3、???????????????????????????????????????1 32 ．3 ．2D N A 瓊脂凝膠電泳??????????????????????????1 42 ．3 ．3 酶切反應(yīng)??????????????????????????????．1 42 ．3 ．4D N A 片段的凝膠回收??????????????????????：???1 42 ．3 ．5 質(zhì)粒D N A 的提取????????????????

4、??????????。1 52 ．3 ．6 大腸桿菌感受態(tài)細(xì)胞的制備??????????????????????．1 62 ．3 ．7 大腸桿菌的轉(zhuǎn)化???????????????????????????．1 62 ．3 ．8 農(nóng)桿菌的凍融轉(zhuǎn)化??????????????????????????．1 72 ．4 且d o t h i d e a 菌株原生質(zhì)體的制備與再生條件優(yōu)化??????????????1 72 ．4 ．1 置d o

5、t h i d e a 菌絲的準(zhǔn)備?????????????????????????1 82 ．4 ．2 酶解液的準(zhǔn)備????????????????????????????．1 82 ．4 ．3 丑d o t h i d e a 原生質(zhì)體的制備??????????????????????．1 82 - 4 ．4 最d o t h i d e a 原生質(zhì)體的再生??????????????????????．1 82 ．5 載體構(gòu)建???

6、????????????????????????????1 82 ．5 ．1p K 0 1 ．H P H 構(gòu)建???????????????????????????????????1 82 ．5 ．2 農(nóng)桿菌的凍融轉(zhuǎn)化??????????????????????????．1 92 ．6 廈d o t h i d e a 與形m a l i v a r ．m a l i 菌株的T - D N A 轉(zhuǎn)化????????????一1 92 ．

7、6 。1 最d o t h i d e a 和形m a l i v a r ．m a l i 菌株對(duì)潮霉素B 的敏感性測定????????1 92 ．6 ．2 丑d o t h i d e a 菌株的T - D N A 轉(zhuǎn)化????????????????????～1 92 ．6 ．3 礦m a l i v a t ．m a l i 菌株的T - D N A 轉(zhuǎn)化???????????????????2 02 ．7 轉(zhuǎn)化子穩(wěn)定性及D N

8、 A 提取與分析????????????????????2 l2 ．7 ．1 轉(zhuǎn)化子的穩(wěn)定性分析?????????????????????????．2 l2 ．7 ．2C T A B 法提取基因組D N A ???????????????????????2 12 ．7 ．3P C R 驗(yàn)證???????????????????????????????．2 22 ．7 ．4S o u t h e r n 雜交???????????????