1、西南大學(xué)碩士學(xué)位論文一株中性蛋白酶產(chǎn)生菌Bacillus sp.的篩選及其酶的純化研究姓名：張新軍申請學(xué)位級別：碩士專業(yè)：微生物學(xué)指導(dǎo)教師：周澤揚(yáng)20060501西南大學(xué)碗士學(xué)位論文再用S u p e r d e x G 7 5 作進(jìn)一步的純化，收集活性峰，將活性樣品刖S D S ．P A G E 檢測，此時的純化樣品己達(dá)電泳純。由總蛋白量為4 7 2 m g ，抑制活力為8 3 0 0 U ，，比活力為l 7 ．6 m I 。／m g

2、 的發(fā)酵液上清液，純化的晟終結(jié)果為：總蛋白量為0 ．7 m g ，抑制活力3 1 2 U ，，比活力為4 4 5 ．7 m l ，／m g ，純化倍數(shù)為2 5 8 9 ，活性回收率為3 ．7 6 。將電泳純樣品經(jīng)蛋白質(zhì)電泳轉(zhuǎn)印到P V D F 膜上屙N 端測序，測序結(jié)果為：V T G T N A V G T G 。對此氨基酸序列作G e n B a n k 數(shù)據(jù)庫檢索比對，能夠與G e n B a n k 中的蘇云金芽孢桿菌的中性蛋白酶

3、( n e u t r a l p r o t e a s e ) ( 登錄號為A A K 6 9 0 7 6 ) 完全匹配，據(jù)此初步判定此蛋白為一種中性蛋白酶。5 具J L 丁質(zhì)酶抑制活性的中性蛋白酶的部分性質(zhì)研究此中性蛋白酶作為幾丁質(zhì)酶抑制物在p H 5 ．5 ．9 ．5 之間有較強(qiáng)的活性，在p H 8 ．0 時，活性最強(qiáng)。該中性蛋白酶不耐高溫，8 0 “ C 水浴3 0 m i n 后幾丁質(zhì)酶抑制活性基本喪失：可溶于水不溶于有機(jī)溶