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1、浙江師范大學(xué)碩士學(xué)位論文盾葉薯蕷(Dioscorea zingiberensis C.H.Wright)再生體系的建立和農(nóng)桿菌介導(dǎo)的rFCA-RRM1基因片段轉(zhuǎn)化研究姓名:任椒矯申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別:碩士專業(yè):生態(tài)學(xué)(植物生態(tài)學(xué))指導(dǎo)教師:馬伯軍200811092 .盾葉薯蕷營(yíng)養(yǎng)器官薯蕷皂甙元含量的H P L C 測(cè)定采用K r o m a s i lC .1 8 柱,甲醇:水= 9 5 :5 流動(dòng)相,流速1 1 0 m l /m i n ,U
2、 V 檢測(cè)器,檢測(cè)波長(zhǎng)2 0 8 n m ,分別對(duì)盾葉薯蕷一年生再生植株的根狀莖、須根和地上纏繞莖進(jìn)行薯蕷皂甙元含量測(cè)定。薯蕷皂甙元在0 .2 4 2 2 5 “ - ' 2 .2 4 2 2 5 9 9 范圍內(nèi)峰面積與其濃度線性關(guān)系良好( R 2 = 0 .9 8 3 3 ) ,精密度R S D 為0 .2 1 %( n 叫) 。H P L C 測(cè)定結(jié)果顯示,一年生根狀莖的薯蕷皂甙元含量為1 .8 2 - 4 - 0 .0 9
3、 %,其地上部分和須根中不含薯蕷皂甙元。3 .盾葉薯蕷遺傳轉(zhuǎn)化體系的初探研究了菌液濃度、侵染時(shí)間、共培養(yǎng)時(shí)間、篩選方式、抗性篩選H y g B 濃度和C e f 抑菌濃度6 個(gè)因子對(duì)盾葉薯蕷遺傳轉(zhuǎn)化的影響,結(jié)果表明:菌液O D 6 0 0值為0 .5 ,侵染3 0 m i n ,共培養(yǎng)3 d ,用5 0 0 m g ·L - 1 的C e f 抑菌,以4 0 m g ·L .1 的H y g B 延遲7 d 篩選,轉(zhuǎn)
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