匍匐翦股穎高效再生體系的建立及農桿菌介導的溶菌酶-GFP基因的轉化.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、匍匐翦股穎(Agrostis.stolonifera.L),英文名Creeping Bentgrass。它具有較強的耐寒性、耐旱性、耐蔭性,并耐低度修剪。利用轉基因技術培養(yǎng)匍匐翦股穎抗病新品種是目前草坪草育種中較為有效的手段之一。本研究的目的是利用農桿菌介導法,將抗病基因溶菌酶基因轉入匍匐翦股穎中,以提高其抗病性能。 本文比較了3個匍匐翦股穎育成品種(潘娜1號、海濱、普特)的再生能力,建立了這三個品種的植株再生體系,從中篩選出再

2、生能力較強的品種。并利用農桿菌介導法對其進行了溶菌酶基因的轉化。主要研究內容及結果如下: 1.建立了匍匐翦股穎三個品種植株再生體系。以匍匐翦股穎潘娜1號、海濱和普特的成熟種子為外植體,進行愈傷組織誘導、分化及生根研究。結果表明:在MS培養(yǎng)基上,以不同濃度2,4-D誘導潘娜1號、海濱和普特的愈傷組織時,普特的愈傷組織誘導率高于潘娜1號和海濱。2mg/L2,4-D+0.1 mg/L6-BA為潘娜1號和海濱誘導愈傷組織的最適激素組合,

3、3mg/L2,4-D+0.1 mg/L6-BA為普特愈傷組織誘導的最適激素組合。誘導率分別為45.2%、76.5%、87.0%; MSO為最適合的分化培養(yǎng)基,分化率分別為50.0%、59.0%、57.6%。1/2MS+1.0mg/LIBA為生根培養(yǎng)基。經比較海濱、普特的再生能力優(yōu)于潘娜1號。 2.探索了匍匐翦股穎基因轉化的影響因素,建立了其基因轉化體系。以培養(yǎng)10周的匍匐翦股穎海濱、普特品種愈傷組織為外植體,以農桿菌菌株為介體,

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