重組瘧疾疫苗pfcp2.9單克隆抗體的特性分析_第1頁
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文檔簡介

1、第二軍醫(yī)大學碩士學位論文重組瘧疾疫苗PfCP-2.9單克隆抗體的特性分析姓名:吳媛申請學位級別:碩士專業(yè):病原生物學指導教師:潘衛(wèi)慶20090501第二軍醫(yī)大學碩士學位論文剩下的1 2 株單抗不識別變性后的P f C P - 2 .9 融合抗原,表明這些單抗識別的是構象表位; ( 3 ) 單抗識別區(qū)域的分析:以本實驗室制備的M S P I - 1 9 和美國N I H 提供的A M A 一1 標準品為抗原,用W e s t e r nb

2、 l o t 的方法對1 8 株單抗的特異性識別區(qū)域進行檢測,結果為識另J M S P I - 1 9 的單抗共5 株,而識別A M A 一1 的單抗有8 株,剩余的5 株單抗既不識另J J M S P I - 1 9 ,也不識別A M A 一1 ,但識別P f C P 一2 .9 融合蛋白; ( 4 ) 表位競爭性分析:以P f C P 一2 .9 為抗原,用競爭E L I S A 方法先后用過量未標記單抗和H R P .標記單抗與之

3、反應,結果有4 對單抗出現(xiàn)相互競爭,提示這4 對單抗可能識別同一表位或者是識別的表位在構象上或者在識別序列上存在相互影響; ( 5 ) 單克隆抗體與瘧原蟲天然蛋白反應性:以處于成熟裂殖體期的惡性瘧原蟲( F C C l /H N株) 為抗原,以血涂片的形式用間接免疫熒光方法( I F A ) 對單克隆抗體的生物學活性進行測定。結果顯示:有8 株單抗能夠不同程度的與瘧原蟲天然蟲體反應。( 6 ) 單抗體外抑制瘧原蟲生長的效力分析:在紅細胞

4、壓積到2 %,起始原蟲率為O .5 %的體系中,采用L D H 方法分別測定各單抗抑制瘧原蟲生長的效力。結果表明:當單抗終濃度為0 .5 m g /m l 時,有6 株單抗不同程度抑制瘧原蟲生長。本研究對P f C P - 2 .9 重組蛋白的一組單克隆抗體的特性進行了初步分析。本研究的結果為開展P f C P - 2 .9 瘧疾疫苗免疫保護作用機制研究提供重要信息和基礎,繼而為設計和完善融合抗原瘧疾疫苗提供依據(jù)。關鍵詞:惡性瘧原蟲,瘧

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