功能化介孔材料的合成及其在蛋白質(zhì)分離中的應用.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、蛋白質(zhì)作為生命的物質(zhì)基礎,在生物體的各項生命活動中起著至關重要的作用,特別是一些低豐度蛋白質(zhì)(LAP),常常是某些疾病的生物標志物,但是在生物體系中不同種類的蛋白質(zhì)含量相差很大,在檢測的過程中,由于高豐度蛋白質(zhì)(HAP)信號的壓制,經(jīng)常會導致LAP信息的丟失,而這些LAP往往具有重要的生物學意義。因此,設計具有高選擇性能的分離材料,對復雜生物體系中的HAP進行去除,并對LAP進行富集,是復雜生物樣品中檢測LAP的有效途徑。本論文根據(jù)蛋白

2、質(zhì)自身等電點(pI)及裸露氨基酸殘基的不同,設計合成了兩種功能化的介孔材料,用于生物樣品中HAP的去除。
  1.運用原子轉移自由基聚合反應,在Santa Barbara Amorphous–15(SBA–15)表面嫁接了叔氨基及羧基官能團,使材料具有pH敏感的性質(zhì),用于分離具有不同pI的蛋白質(zhì)。紅外、熱重、X射線衍射、Zeta電勢、元素分析、透射電鏡、氮吸附等表征結果顯示了材料的成功制備。在不同pH條件下,叔氨基和羧基的質(zhì)子化及

3、去質(zhì)子化效應使材料表面帶有不同的電荷,通過靜電作用吸附帶有相反電荷的蛋白質(zhì),實現(xiàn)了對酸性和堿性蛋白質(zhì)的特異性分離。此外,還將實驗中篩選出的材料應用于實際生物樣品中HAP的去除,凝膠電泳半定量結果顯示,材料對雞蛋清中卵清白蛋白和溶菌酶的去除率能夠達到99%和95%,對血清中白蛋白的去除率能達到80%,這些數(shù)據(jù)表明,所設計合成的材料能顯著地降低樣品的復雜性,有利于樣品中其它LAP的檢測。
  2.通過熱引發(fā)的八乙烯基多面體低聚倍半硅氧

4、烷的自由基聚合反應合成了具有高比表面積的介孔材料,并以此為基質(zhì),對其表面進行后修飾和Cu2+的固定,利用Cu2+與蛋白質(zhì)中裸露組氨酸(His)的親和作用,選擇性吸附樣品中富含裸露His的HAP。表征及吸附實驗結果表明該材料具有較大的比表面積、較好的吸附選擇性和較高的吸附容量(對牛血紅蛋白的吸附容量可達3150mg/g),且重復使用六次后吸附容量基本保持不變。另外,該材料不僅能高效地去除全血中高豐度的血紅蛋白和白蛋白,而且能夠富集細胞裂解

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