1、乳酸菌細(xì)菌素是乳酸菌在代謝過程中由核糖體產(chǎn)生的一類具有抑菌活性的多肽或蛋白類物質(zhì)。它可被人體降解，具有無毒、無殘留、高效、穩(wěn)定性好、無抗藥性等優(yōu)點(diǎn)，因此成為當(dāng)前天然食品防腐劑研究與開發(fā)的熱點(diǎn)。但是，目前只有Nisin實現(xiàn)了工業(yè)化生產(chǎn)，其它的細(xì)菌素都還不能進(jìn)行大規(guī)模的生產(chǎn)或還處于研究階段。細(xì)菌素產(chǎn)量低，是限制其工業(yè)化生產(chǎn)最大的瓶頸。因此，如何提高細(xì)菌素產(chǎn)量一直是國內(nèi)外研究的熱點(diǎn)。
　　本研究以植物乳桿菌B23作為細(xì)菌素生產(chǎn)菌，該菌能

2、在MRS培養(yǎng)基中穩(wěn)定的產(chǎn)生具有抗單增李斯特菌活性的細(xì)菌素Lac-B23，但產(chǎn)量較低。首先利用單因素試驗對 MRS培養(yǎng)基成分進(jìn)行優(yōu)化和篩選，在此基礎(chǔ)上運(yùn)用PB試驗、最陡爬坡試驗和CCD試驗得到了最佳產(chǎn)細(xì)菌素Lac-B23的培養(yǎng)基配方：葡萄糖20g/L、酵母浸粉10g/L、磷酸氫二鉀5 g/L、硫酸錳0.1g/L、吐溫-801.88mL/L、乙酸鈉9.9g/L。并在此條件下發(fā)酵，細(xì)菌素Lac-B23產(chǎn)量比未優(yōu)化前提高了8倍。研究了初始 pH

3、、發(fā)酵溫度、初始接菌濃度、培養(yǎng)時間對細(xì)菌素Lac-B23合成的影響。結(jié)果表明當(dāng)初始 pH=7，發(fā)酵溫度為37℃、初始接菌濃度為109CFU/mL、培養(yǎng)時間在12-16h時最有利于細(xì)菌素Lac-B23合成。研究了外源添加物對細(xì)菌素Lac-B23合成的影響，發(fā)現(xiàn)酪氨酸、精氨酸、苯丙氨酸、谷氨酰胺和亮氨酸對細(xì)菌素Lac-B23的合成具有正向刺激作用。然而，甘油和丙酮酸對細(xì)菌素產(chǎn)量沒有明顯誘導(dǎo)作用。研究自我誘導(dǎo)對細(xì)菌素Lac-B23合成的影響，

4、發(fā)現(xiàn)當(dāng)初始接菌濃度≥106CFU/mL時，發(fā)酵上清的抑菌活性隨著初始接菌濃度的增加而增加，低于這個值時發(fā)酵上清液中檢測不到抑菌活性。說明細(xì)菌素 Lac-B23的合成依賴于菌體密度。研究信號分子對細(xì)菌素合成的影響，發(fā)現(xiàn)當(dāng)信號分子添加量≤10％時能促進(jìn)細(xì)菌素的合成。此外，蛋白酶E和蛋白酶 K能降解發(fā)酵液中的信號分子，這說明信號分子是一類肽或蛋白物質(zhì)。研究了微生物共培養(yǎng)對細(xì)菌素Lac-B23合成的影響。首先對誘導(dǎo)菌進(jìn)行篩選，得出單增李斯特菌和