基于熒光標(biāo)記適配體的熒光各向異性法檢測(cè)小分子.pdf_第1頁(yè)
已閱讀1頁(yè),還剩94頁(yè)未讀, 繼續(xù)免費(fèi)閱讀

下載本文檔

版權(quán)說(shuō)明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權(quán),請(qǐng)進(jìn)行舉報(bào)或認(rèn)領(lǐng)

文檔簡(jiǎn)介

1、第一章:對(duì)核酸適配體的性質(zhì)和篩選作了簡(jiǎn)要介紹,詳述了熒光各向異性(FA)法的定義和其在生物分析化學(xué)領(lǐng)域中的應(yīng)用,闡述了本論文的立題背景,所研究的主要內(nèi)容和創(chuàng)新點(diǎn)。
  第二章:利用適配體具有親和力高、穩(wěn)定性好、易于合成和標(biāo)記的優(yōu)點(diǎn),結(jié)合熒光各向異性法簡(jiǎn)單穩(wěn)定的特點(diǎn),建立了一種非競(jìng)爭(zhēng)性的基于四甲基羅丹明(TMR)熒光基團(tuán)標(biāo)記適配體的FA分析方法用于赭曲霉素A(OTA)的檢測(cè)。TMR和適配體堿基間存在的分子內(nèi)作用力會(huì)影響TMR的局部轉(zhuǎn)

2、動(dòng)和FA值,目標(biāo)物與適配體結(jié)合后,適配體構(gòu)象發(fā)生改變,引起分子內(nèi)作用力改變,TMR的FA值也隨之變化。將TMR標(biāo)記到OTA適配體的不同位點(diǎn)(適配體末端和T堿基)上,考察相應(yīng)適配體對(duì)OTA的FA響應(yīng),發(fā)現(xiàn)第10個(gè)堿基T上標(biāo)記有TMR的適配體( T10-TMR-O36)展現(xiàn)出顯著的FA降低響應(yīng)?;赥10-TMR-O36適配體的FA分析方法檢測(cè)OTA具有很高的靈敏度和很好的選擇性,檢出限為3 nM,檢測(cè)范圍為3 nM-3μM,OTA的結(jié)構(gòu)類

3、似物不會(huì)對(duì)OTA的檢測(cè)產(chǎn)生干擾。
  第三章:本章利用TMR標(biāo)記的腺苷適配體發(fā)展了一種簡(jiǎn)單高效的FA分析方法用于直接檢測(cè)腺苷。我們實(shí)現(xiàn)了將TMR標(biāo)記于適配體的5'端、3'端、A堿基、C堿基和T堿基上,更為全面的考察了這些TMR標(biāo)記適配體對(duì)腺苷的不同F(xiàn)A響應(yīng)。適配體和腺苷結(jié)合后,TMR和它周圍的G堿基間的分子內(nèi)作用力改變,引起TMR的局部轉(zhuǎn)動(dòng)和FA值也發(fā)生變化。其中第16個(gè)堿基C上標(biāo)記TMR的適配體C16-TMR-Ad25對(duì)腺苷展現(xiàn)

4、出最大的FA降低響應(yīng),并可檢測(cè)到2μM的腺苷。此外,此種FA分析方法還可應(yīng)用于復(fù)雜基質(zhì)中腺苷的檢測(cè)。
  第四章:本章采用和前面兩章相似的檢測(cè)原理,建立了一種靈敏的三磷酸腺苷(ATP)檢測(cè)方法。用于檢測(cè)腺苷的適配體同樣適用于檢測(cè)ATP,我們篩選出對(duì)ATP有較大FA響應(yīng)的兩個(gè)TMR標(biāo)記的適配體,即在第16個(gè)堿基C上標(biāo)記 TMR的 C16-TMR-Ad25和在第23個(gè)堿基 A上標(biāo)記 TMR的A23-TMR-Ad25,這兩個(gè)適配體都可實(shí)

溫馨提示

  • 1. 本站所有資源如無(wú)特殊說(shuō)明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請(qǐng)下載最新的WinRAR軟件解壓。
  • 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請(qǐng)聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
  • 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁(yè)內(nèi)容里面會(huì)有圖紙預(yù)覽,若沒(méi)有圖紙預(yù)覽就沒(méi)有圖紙。
  • 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
  • 5. 眾賞文庫(kù)僅提供信息存儲(chǔ)空間,僅對(duì)用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護(hù)處理,對(duì)用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對(duì)任何下載內(nèi)容負(fù)責(zé)。
  • 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當(dāng)內(nèi)容,請(qǐng)與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
  • 7. 本站不保證下載資源的準(zhǔn)確性、安全性和完整性, 同時(shí)也不承擔(dān)用戶因使用這些下載資源對(duì)自己和他人造成任何形式的傷害或損失。

最新文檔

評(píng)論

0/150

提交評(píng)論