P4VP-b-PEG-b-P4VP嵌段共聚物用于毛細(xì)管電泳分離堿性蛋白質(zhì).pdf_第1頁(yè)
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1、復(fù)雜生物體系中的蛋白質(zhì)的分離分析是一項(xiàng)具有挑戰(zhàn)性的任務(wù),是生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域研究中的一個(gè)重要部分,需要最先進(jìn)的分離技術(shù)和復(fù)雜精細(xì)的儀器裝置。毛細(xì)管區(qū)帶電泳(capillary zone electrophoresis,CZE)及其衍生出的一系列分離技術(shù)不僅具有分離效率高、分析時(shí)間短的優(yōu)點(diǎn),而且對(duì)樣品和試劑消耗極少,非常適合蛋白質(zhì)的分離分析,在蛋白質(zhì)組學(xué)研究中有巨大的應(yīng)用潛力。利用毛細(xì)管電泳(capillary electrophoresis,

2、CE)技術(shù)分離蛋白質(zhì)的應(yīng)用研究,主要集中于人體體液、農(nóng)產(chǎn)品和藥物的分析上,主要面對(duì)的問題是被分析蛋白在毛細(xì)管壁的吸附問題。毛細(xì)管壁對(duì)蛋白質(zhì)的吸附會(huì)造成一系列危害:如樣品回收率降低,基線不穩(wěn)定,結(jié)果的重復(fù)性變差,定性定量困難等,最終還將極大地影響毛細(xì)管柱的使用壽命。因此人們一直在探索各種方法,以減小毛細(xì)管電泳過程中的蛋白質(zhì)吸附現(xiàn)象,提高分離效率,物理吸附涂層方法由于涂層的制作簡(jiǎn)單且具備一般分離所需的穩(wěn)定性而備受青睞。本文對(duì)陽(yáng)離子聚合物物理

3、涂層的設(shè)計(jì)合成與其在分離堿性蛋白質(zhì)時(shí)的效果及機(jī)理進(jìn)行了研究。主要內(nèi)容如下:
   ⑴使用原子轉(zhuǎn)移自由基聚合(ATRP)方法合成了具有不同聚(4-乙烯基吡啶)(P4VP)嵌段長(zhǎng)度的聚(4-乙烯基吡啶)-b-聚乙二醇-b-聚(4-乙烯基吡啶)(P4VP-b-PEG-b-P4VP)三嵌段聚合物,并用核磁共振氫譜及凝膠滲透色譜對(duì)其結(jié)構(gòu)及分子量分布進(jìn)行了表征。
   ⑵將P4VP-b-PEG-b-P4VP用作毛細(xì)管內(nèi)壁的物理涂層材

4、料,對(duì)堿性混合蛋白質(zhì)進(jìn)行了分離,并研究了緩沖液pH對(duì)涂層性能的影響,比較了不同P4VP嵌段長(zhǎng)度的三嵌段聚合物涂層的性能,以及和兩嵌段聚合物涂層相比的優(yōu)缺點(diǎn)。三嵌段聚合物P4VP-b-PEG-b-P4VP具有pH敏感性,通過緩沖液pH的調(diào)控可以控制電滲流的速度,調(diào)節(jié)待分析組分的分離度和分離時(shí)間。
   ⑶測(cè)量了裸管和三嵌段聚合物涂層管中蛋白質(zhì)與毛細(xì)管壁間的靜電相互作用,證明了陽(yáng)離子聚合物涂層對(duì)堿性蛋白質(zhì)吸附的屏蔽作用,并進(jìn)一步測(cè)算

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