1、本論文詳細綜述了毛細管電泳的發(fā)展歷史和研究現(xiàn)狀，認識到毛細管電泳雖然具有分離效率高、分析速度快等優(yōu)點，但也存在毛細管的負載能力小、紫外檢測的靈敏度較差等問題。采用在線預富集方法可以克服毛細管電泳的缺限。論文深入研究了多種預富集方法，取得了較好的效果；同時一維毛細管電泳由于分辨率和峰容量較低，難以滿足復雜樣品的分離要求，論文對二維毛細管電泳分離復雜蛋白質的研究進行了初步探索，主要內容包括： 1.研究了毛細管電泳間接紫外檢測分離測定

2、煙草中的六種無機陰離子，考察了分離電壓、表面活性劑的種類及濃度、背景電解質的種類及濃度、pH等因素對陰離子分離的影響。發(fā)現(xiàn)背景電解質對無機陰離子的分離有較大影響，并詳細研究了其原理。在選定的實驗條件下，測定了Cl-、NO2-、NO3-、SO42-、F-、HPO42-等離子，檢出限為0.2～0.8mg/L，相對標準偏差(RSD)為1.9～4.7％，并通過加標回收實驗驗證了方法的可行性。 2.研究了一種在柱順序富集方法—陰離子選擇性

3、耗盡進樣(ASEI)-堿堆積(BS)富集毛細管電泳分離六種無機陰離子。用電滲流改性劑十四烷基三甲基溴化銨(TTAB)抑制電滲流，毛細管內壁動態(tài)吸附緩沖溶液中的TTAB，電動進樣之前高差法引入一段水塞，吸附到毛細管內壁上的TTAB溶解到水中，使該段毛細管的zeta電勢變負，向進樣端的電滲流增強。電動進樣時，樣品中的陰離子快速遷移并堆積在毛細管內水塞和緩沖溶液的界面上，同時電滲流將水塞排出毛細管。這種方法可允許樣品池中大部分陰離子進入毛細管

4、內并形成很窄的區(qū)帶，同時避免了樣品水區(qū)帶對分離的影響。水塞在此起三個作用：溶解毛細管內壁吸附的TTAB使毛細管內電滲流增大，提供局部高場強和增大進樣量。進樣之后電動引入NaOH，快速遷移的OH-與來自緩沖溶液的Tris+形成低電導區(qū)，進一步壓縮樣品區(qū)帶，堿堆積可使進樣時間進一步增大。同常規(guī)電動進樣相比，陰離子選擇性耗盡進樣-堿堆積可達到(0.8～1.3)×105倍的樣品富集。論文對實驗條件和富集機理進行了研究。用該法測定了煙草中無機陰離

5、子，六種無機陰離子的濃度檢出限低于6ng/L。 3.研究了一種基于離子交換保留歷程的固相萃取方法用于CZE分離之前在線陽離子交換預富集。整個裝置包括預富集毛細管和分離毛細管，二者通過一段帶孔的聚四氟乙烯(PTFE)套管和一個三通接頭連接。預富集毛細管內壁鍵合羧基陽離子交換基團。進樣時分析物陽離子保留在預富集毛細管的固定相上，廢液由三通閥流出而不進入分離毛細管。關閉三通閥后，用2mol/L的氯化銨溶液洗脫被吸附的分析物，進行毛細管

6、區(qū)帶電泳分離。在0.03mL/min的進樣速度下，進樣10min，可成功富集分離低濃度的待測物質，靈敏度比常規(guī)電動進樣提高3個數(shù)量級。論文詳細說明了預富集柱及三通接口的制作。在線富集分離過程包括毛細管的沖洗、進樣吸附、洗脫、區(qū)帶電泳分離。普萘洛爾在線富集后的濃度檢出限為0.32μg/L(進樣10min，進樣速度為0.03mL/min)，未富集時濃度檢出限為1.38mg/L(10kV電動進樣10s)。該方法采用大體積進樣濃縮，有效地提高了

7、毛細管電泳分離-紫外檢測的分析靈敏度。 4.進行了二維毛細管電泳分離復雜蛋白質的初步探索，詳細研究了作為第一維分離的毛細管等電聚焦實驗條件(包括載體兩性電解質的濃度、甲基纖維素的濃度、毛細管長度、聚焦電壓、緩沖溶液的組成和濃度、pH、四甲基乙二胺和乙二醇的濃度等)對蛋白質分離的影響，以及毛細管無膠篩分電泳(CNGE)分離蛋白質的最佳條件(包括緩沖溶液的濃度、篩分介質、添加劑、緩沖溶液的pH、十二烷基硫酸鈉和硼酸的濃度等)。分別用