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![基于半胱氨酸與重金屬離子相互作用的分析應(yīng)用研究.pdf_第1頁(yè)](https://static.zsdocx.com/FlexPaper/FileRoot/2019-3/7/23/d1ee2c31-aac1-4a30-b595-467adacd1e64/d1ee2c31-aac1-4a30-b595-467adacd1e641.gif)
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1、半胱氨酸是組成蛋白質(zhì)的20余種氨基酸中唯一帶有巰基的氨基酸,其在生物過(guò)程中扮演著重要的角色,同時(shí)對(duì)人體內(nèi)疾病的控制也有極大的作用,因此半胱氨酸的檢測(cè)和應(yīng)用引起了人們的廣泛關(guān)注。另外,半胱氨酸還可以與重金屬離子發(fā)生作用,其作用主要是通過(guò)巰基與重金屬離子不同的結(jié)合能力來(lái)實(shí)現(xiàn)的,并且已有文獻(xiàn)報(bào)道半胱氨酸的巰基能被銅離子選擇性氧化。本文將半胱氨酸與重金屬離子之間的作用應(yīng)用到了重金屬離子和半胱氨酸的分析檢測(cè)中。不但拓展了半胱氨酸的應(yīng)用,而且還建立
2、了一種檢測(cè)半胱氨酸的新方法。具體內(nèi)容包括以下三個(gè)方面:
(1)利用半胱氨酸與銅離子的作用實(shí)現(xiàn)銅離子的分析檢測(cè)。研究發(fā)現(xiàn)半胱氨酸能夠通過(guò)金硫鍵與十六烷基三甲基溴化銨包被的金納米顆粒結(jié)合,在酸性條件下誘導(dǎo)金納米顆粒發(fā)生聚集,導(dǎo)致金納米顆粒的等離子體共振吸收發(fā)生變化。而銅離子能選擇性氧化半胱氨酸的巰基,阻止半胱氨酸與金納米顆粒之間金硫鍵的形成,從而抑制金納米顆粒的聚集。據(jù)此,以金納米顆粒作為銅離子氧化半胱氨酸的可視化指示劑,通過(guò)
3、檢測(cè)金納米顆粒525 nm處的等離子體共振吸收建立了一種高選擇性檢測(cè)銅離子的色度分析方法。吸光度值與8.0×10-8~2.0×10-6 mol/L范圍內(nèi)的Cu2+濃度呈良好的線性關(guān)系,相關(guān)系數(shù)為0.9962,檢出限(3σ/k)為1.5×10-9mol/L。該方法用于天然水體中痕量銅離子的測(cè)定,具有較好的精密度和準(zhǔn)確度。
(2)基于免標(biāo)記的DNA熒光法檢測(cè)銀離子和半胱氨酸。Sybr GreenⅠ能選擇性識(shí)別單雙鏈DNA,是常
4、用于PCR擴(kuò)增反應(yīng)的熒光指示劑。本文設(shè)計(jì)了一段富含C堿基的單鏈DNA序列,利用銀離子與C堿基形成C-Ag-C的復(fù)合物,使之形成類(lèi)似于雙鏈DNA的結(jié)構(gòu)。當(dāng)有半胱氨酸存在時(shí),半胱氨酸與C堿基發(fā)生競(jìng)爭(zhēng)反應(yīng)阻止C-Ag-C結(jié)構(gòu)的形成。以Sybr GreenⅠ為熒光指示劑建立了一種高選擇性、高靈敏度同時(shí)檢測(cè)銀離子和半胱氨酸的DNA免標(biāo)記的方法。該方法檢測(cè)銀離子的線性范圍為12.5~450 nmol/L,相關(guān)系數(shù)為0.9970,檢出限為1.25 n
5、mol/L;檢測(cè)半胱氨酸的的線性范圍為1.25~425 nmol/L,相關(guān)系數(shù)為-0.9968,檢出限為0.125 nmol/L。
(3)基于金納米簇-汞離子體系熒光恢復(fù)檢測(cè)半胱氨酸。汞離子是良好的熒光猝滅劑,能猝滅熒光小分子、有機(jī)染料、量子點(diǎn)等的熒光;金納米簇作為熒光納米材料由于其優(yōu)良的光學(xué)性質(zhì),引起了人們的極大興趣。生物大分子牛血清白蛋白合成的金納米簇與汞離子之間由于存在Hg2+-Au+作用,導(dǎo)致金納米簇?zé)晒獗烩?。?/p>
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