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文檔簡介
1、東亞飛蝗是世界性的農(nóng)業(yè)害蟲,對農(nóng)業(yè)危害嚴(yán)重。線紋折麻蠅(Blaesoxipha lapidosa)是一種蝗蟲寄生性蠅類,可寄生多種蝗蟲。本文通過尋找東亞飛蝗免疫與繁殖相關(guān)表達(dá)基因,來研究線紋折麻蠅幼蟲與東亞飛蝗的寄生關(guān)系,以及東亞飛蝗免疫與繁殖之間的權(quán)衡關(guān)系,為更好的理解東亞飛蝗在生態(tài)環(huán)境中的適應(yīng)策略提供理論基礎(chǔ)。
本文利用第二代高通量測序技術(shù),對注射葡聚微珠、人工感染藤黃微球菌、人工寄生線紋折麻蠅幼蟲后的東亞飛蝗雌成蟲的卵巢
2、與脂肪體混合建庫測序,獲得8G的東亞飛蝗卵巢與脂肪體混合的轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)庫。并采用兩種方法----無參拼接法和有參拼接法對轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)庫進(jìn)行拼接,通過Trinity軟件獲得54,740條unigenes,通過Cufflinks軟件獲得38,181條unigenes。然后對所有的unigenes進(jìn)行注釋。為了探究線紋折麻蠅寄生后,東亞飛蝗在免疫與繁殖方面的基因表達(dá)差異,分別進(jìn)行了葡聚微珠、藤黃微球菌、線紋折麻蠅處理4小時和6天的東亞飛蝗雌成蟲的
3、卵巢和脂肪體混合建庫,進(jìn)行數(shù)字表達(dá)譜測序,并做兩次DGE測序重復(fù)。通過對這12個DGE的比較共獲得61條序列,包含四個方面的內(nèi)容:能量、異物識別、免疫和繁殖。能量相關(guān)基因是昆蟲儲存蛋白(Hexamerin-like protein)。異物識別相關(guān)基因是革蘭氏陰性菌表面識別蛋白(GNBP),革蘭氏陽性菌表面識別蛋白(PGRP),凝集素(Lectin)和載脂蛋白-3b(Apolipophorin-3b)。免疫相關(guān)基因是雙翅殺菌肽(Lm-di
4、ptericin),絲氨酸蛋白酶(Serine proteinase),磷酸絲氨酸蛋白磷酸酶(Phosphoserine phosphatase),絲氨酸蛋白酶抑制劑前體(Serpin precursor),絲氨酸蛋白酶抑制劑(Serpin),酚氧化酶原(Pro-phenoloxidase),酚氧化酶亞基(Phenoloxidase subunit A3),溶菌酶(Lysozyme),細(xì)胞色素P450(Cytochrome P450),
5、toll類似蛋白(Tolloid-like protein2),toll蛋白(Protein toll),toll蛋白受體(Toll-like receptor)。繁殖相關(guān)基因是保幼激素(Juvenile hormone),卵黃原蛋白(Vitellogenin)。并且比較了篩選得到的差異基因的表達(dá)值,用以預(yù)測差異基因的功能,發(fā)現(xiàn)藤黃微球菌在進(jìn)入東亞飛蝗體內(nèi)4小時,東亞飛蝗體內(nèi)的殺菌作用便達(dá)到高峰期,但包囊反應(yīng)在4小時還未有明顯反應(yīng),要比
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