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![雷公藤紅素對(duì)人骨肉瘤細(xì)胞增殖、凋亡的影響及作用機(jī)制研究.pdf_第1頁](https://static.zsdocx.com/FlexPaper/FileRoot/2019-3/10/8/2118ab00-f219-41c6-a607-ab2128d27290/2118ab00-f219-41c6-a607-ab2128d272901.gif)
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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:
明確雷公藤紅素對(duì)人骨肉瘤細(xì)胞增殖、凋亡的影響及相關(guān)作用機(jī)制。
方法:
MTT比色法檢測(cè)不同濃度、不同作用時(shí)間的雷公藤紅素對(duì)人骨肉瘤細(xì)胞增殖的作用;Hoechst33258染色熒光倒置顯微鏡下觀察不同濃度雷公藤紅素作用下人骨肉瘤細(xì)胞形態(tài)的變化;流式細(xì)胞技術(shù)檢測(cè)不同濃度雷公藤紅素對(duì)人骨肉瘤細(xì)胞凋亡的影響;Westernblot檢測(cè)不同濃度雷公藤紅素作用下人骨肉瘤細(xì)胞凋亡相關(guān)蛋白Bcl-2,Bax,cas
2、pase-3,caspase-8,procaspase-9,cytochromec和PARP的表達(dá)情況。
結(jié)果:
MTT比色法結(jié)果顯示,雷公藤紅素可顯著抑制人骨肉瘤細(xì)胞(MG-63,U-2OS及HOS)的增殖,其抑制效應(yīng)呈現(xiàn)濃度依賴性和時(shí)間依賴性。通過繪制細(xì)胞生長曲線發(fā)現(xiàn)雷公藤紅素對(duì)人骨肉瘤U-2OS細(xì)胞的增殖抑制作用最為明顯;Hoechst33258染色熒光倒置顯微鏡下觀察發(fā)現(xiàn)隨著雷公藤紅素作用濃度的升高,人骨肉瘤
3、U-2OS細(xì)胞內(nèi)出現(xiàn)明顯的核濃縮、核膜核仁破碎等典型的細(xì)胞凋亡形態(tài)變化;流式細(xì)胞技術(shù)檢測(cè)提示,雷公藤紅素可提高人骨肉瘤U-2OS細(xì)胞的凋亡率,并呈現(xiàn)濃度依賴性;Westernblot檢測(cè)發(fā)現(xiàn)隨著雷公藤紅素作用濃度的升高,人骨肉瘤U-2OS細(xì)胞內(nèi)線粒體凋亡途徑相關(guān)蛋白表達(dá)量均發(fā)生了顯著變化:Bax/Bcl-2比值升高,procaspase-9表達(dá)量下降,cytochromec表達(dá)量升高,而死亡受體凋亡途徑相關(guān)蛋白caspase-8表達(dá)量無
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