1、第一部分 PRPS1在兒童急性白血病中的表達及臨床意義
　　目的：探討磷酸核糖焦磷酸合成酶1（PRPS1）基因在兒童急性白血?。ˋL）中的表達，分析其表達水平與 AL臨床指標的相關(guān)性，初步探討PRPS1在AL中的臨床意義。
　　方法：采用實時熒光定量PCR和免疫組化（IH）的方法檢測176例兒童AL（初診126例，完全緩解50例）骨髓標本中PRPS1的表達水平，收集患兒病程中診斷結(jié)果，臨床表現(xiàn)以及治療反應(yīng)等臨床特征信息，分析

2、其PRPS1表達水平與臨床特征的相關(guān)性。以21例非惡性血液病患兒骨髓作為對照組患兒。
　　結(jié)果：
　?。?）在 B-ALL組中，PRPS1初診組表達水平顯著高于對照組，同時高于完全緩解組（均P＜0.0001）；在T-ALL及AML組中，僅初診組與完全緩解組表達有顯著差異（均P＜0.0001）。
　　（2）在 B-ALL組中，PRPS1表達水平隨危險度升高而增加（P＜0.01）；在T-ALL組中各危險度分組之間則無明顯差

3、異（P＞0.05）；在AML組中，僅低危組與高危組差異具有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。
　?。?）PRPS1高表達與B-ALL患兒的高WBC計數(shù)及MRD陽性相關(guān)(P=0.020,P=0.026)。
　?。?） PRPS1與之前證實的復發(fā)相關(guān)基因NT5C2表達水平呈正相關(guān)（P＜0.05）。
　　結(jié)論：PRPS1是兒童B-ALL預后不良相關(guān)危險因素，有望成為判斷預后，指導個性化化療的指標。
　　第二部分 PRPS1基

4、因過表達對 Sup-b15及Raji細胞株生物學行為調(diào)控作用及機制研究
　　目的:利用慢病毒上調(diào)PRPS1基因的表達，研究其對Sup-b15及Raji細胞株增殖、凋亡及細胞周期的調(diào)控作用及機制。
　　方法:采用PRPS1過表達慢病毒感染Sup-b15及Raji細胞株構(gòu)建實驗組 PRPS1過表達細胞；采用 GFP過表達慢病毒感染 Sup-b15及Raji細胞株作為對照組細胞；使用 CCK-8法檢測細胞增殖；流式細胞術(shù)檢測細胞周

5、期及凋亡；采用 qRT-PCR、Western-blot方法檢測PRPS1及增殖、凋亡相關(guān)基因c-myc,cyclin E1,Bcl-2,CDK2,and caspase-3基因和蛋白表達水平的變化。
　　結(jié)果:
　?。?）與對照組細胞相比，實驗組細胞PRPS1 mRNA和蛋白表達水平均顯著上升，P＜0.05；
　?。?）CCK-8法檢測細胞增殖結(jié)果顯示，實驗組 Sup-b15及 Raji細胞的增殖率均上升，與對照組相

6、比，P＜0.001；
　?。?）流式細胞學檢測細胞凋亡和周期結(jié)果顯示，與對照組相比，實驗組 Sup-b15及 Raji細胞的凋亡率均下降，P＜0.01；細胞周期差異無統(tǒng)計學意義，P＞0.05。
　?。?）與對照組相比，實驗組Sup-b15及Raji細胞的Bcl-2，CDK2基因和蛋白表達水平均顯著提高，P＜0.001； Caspase-3蛋白水平表達下調(diào)P＜0.01；C-myc及Cyclin E1未見明顯變化。
　　結(jié)