1、目的：
　　1.研究S100P和S100A2蛋白在人外泌汗腺的表達(dá)情況，并聯(lián)合特定角蛋白進(jìn)行免疫熒光雙染以區(qū)分外泌汗腺的分泌部和導(dǎo)管部。2.研究SD大鼠足墊汗腺發(fā)生發(fā)育和功能成熟的過程。
　　方法：
　　1.獲取人體正常皮膚標(biāo)本，制成石蠟包埋標(biāo)本后進(jìn)行連續(xù)切片，利用免疫熒光組織化學(xué)染色法檢測S100P和S100A2在外泌汗腺的表達(dá)情況，然后利用免疫熒光雙染檢測以下蛋白：α-SMA/S100P，CK14/S100A2，C

2、K7/S100A2，CK15/S100P和CK18/S100A2，在熒光顯微鏡下觀察并拍照。2.獲取SD大鼠從E16.5天-E21.5天、出生后P1-P14天、3周、4周及成年大鼠的足墊全層皮膚標(biāo)本，進(jìn)行石蠟包埋及切片，行HE染色，及免疫熒光組織化學(xué)染色法檢測以下蛋白：CAⅡ、F-actin、β-catenin、CollagenⅣ；免疫熒光雙染檢測：α-SMA/CK14；并利用碘－淀粉實(shí)驗(yàn)檢測不同發(fā)育階段SD大鼠足墊的發(fā)汗功能。

3、　　結(jié)果：
　　1.人外泌汗腺免疫熒光組織化學(xué)染色結(jié)果顯示：S100P僅表達(dá)于汗腺導(dǎo)管部的內(nèi)層細(xì)胞，S100A2表達(dá)于除表皮內(nèi)導(dǎo)管外的其他導(dǎo)管部的外層細(xì)胞，兩者在分泌部均不表達(dá)。2.SD大鼠足墊皮膚HE染色結(jié)果顯示：E19.5天表皮基底層出現(xiàn)汗腺胚芽，P1天汗腺細(xì)胞長入真皮淺層，并呈條索狀繼續(xù)向真皮深層生長，P7天部分汗腺形成中央腔，P10天分泌部腺體初步形成球狀結(jié)構(gòu)。熒光染色顯示：汗腺側(cè)膜持續(xù)表達(dá)β-catenin，P6天汗腺細(xì)

4、胞開始表達(dá)CollagenⅣ，P9天F-actin開始在頂膜表達(dá)，P13天以上極性蛋白均分別完整表達(dá)于汗腺側(cè)膜、基底膜和頂膜。CAⅡ的熒光染色和α-SMA+CK14的雙染結(jié)果顯示：CK14在汗腺細(xì)胞持續(xù)表達(dá)，P6天部分汗腺細(xì)胞開始表達(dá)CAⅡ和α-SMA，而內(nèi)層細(xì)胞CK14表達(dá)則逐漸減弱，P13天分泌部散在的分泌細(xì)胞表達(dá)CAⅡ，分泌細(xì)胞完全不表達(dá)CK14，肌上皮細(xì)胞表達(dá)CK14和α-SMA，導(dǎo)管部細(xì)胞均表達(dá)CK14，不表達(dá)CAⅡ和α-SM

5、A，與成年大鼠的表達(dá)情況一樣。碘－淀粉實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示：直到P14天SD大鼠足墊汗腺才開始出現(xiàn)泌汗功能，P21天泌汗功能得到進(jìn)一步完善。
　　結(jié)論：
　　1.S100P和S100A2可作為外泌汗腺導(dǎo)管部不同細(xì)胞的標(biāo)記蛋白，將S100P或S100A2聯(lián)合CK7或CK15或CK18進(jìn)行免疫熒光組織化學(xué)雙染，可快速、準(zhǔn)確、直觀地區(qū)分外泌汗腺分泌部和導(dǎo)管部。2.SD大鼠出生時(shí)足墊汗腺僅完成了初級發(fā)育，細(xì)胞分化以及汗腺結(jié)構(gòu)和功能成熟主要發(fā)