射頻加熱增強熱啟動子誘導下的自殺基因治療乳腺癌:面向介入分子影像引導下的基因治療.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的:
  通過研究射頻加熱技術增強熱啟動子誘導下的單純皰疹病毒胸苷激酶/更昔洛韋(herpes simplex virus thymidine kinase/Ganciclovir,HSV-TK/GCV)基因治療系統(tǒng)對多柔比星耐藥性乳腺癌細胞的療效,為創(chuàng)建介入分子影像引導下的射頻加熱聯(lián)合基因治療新方法奠定基礎。
  方法:
  體外實驗:腔室內四孔板接種人多柔比星耐藥性乳腺癌MCF7/A細胞,通過慢病毒將熱啟動子引導

2、下的HSV-TK基因導入MCF7/A細胞。利用熒光鏡檢及qPCR技術對基因表達進行檢測。將腔室內四孔板置于37℃水浴中,射頻加熱后加更昔洛韋(10ug/ml)處理細胞。通過檢測細胞增殖和凋亡來評估熱啟動子引導下的基因治療聯(lián)合射頻加熱對耐藥性乳腺癌細胞的殺傷效果。
  體內實驗:建立裸鼠乳腺癌模型,并將荷瘤裸鼠分成4組:包括對照組(Control組);射頻加熱組(RFH組);基因治療組(PHSP-TK組);及射頻加熱結合基因治療組(

3、PHSP-TK+RFH組),通過MRI對腫瘤大小變化進行檢測。最后通過病理學技術對照證實MRI的表現(xiàn)。
  結果:
  熒光鏡檢及qPCR結果證實通過慢病毒導入的熱啟動子誘導的TK基因在射頻加熱條件下在乳腺癌細胞中有大量表達。PHSP-TK+ RFH組貼壁細胞數(shù)明顯減少,死亡細胞明顯增多,與PHSP-TK組及RFH組相比差異顯著(p<0.01)。流式檢測進一步證實PHSP-TK+ RFH組腫瘤細胞的凋亡明顯增加(p<0.05

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