1、甘草是世界上應用最廣泛的中草藥之一，屬溫補性中藥，也廣泛用于食品、煙草和化妝品行業(yè)。利用細胞培養(yǎng)技術來生產(chǎn)甘草活性物質(zhì)是目前解決甘草資源問題最有潛力的方法之一。由于懸浮細胞中甘草黃酮的含量低，使得產(chǎn)業(yè)化的應用成本較高，本文旨在建立甘草細胞培養(yǎng)高產(chǎn)合成甘草黃酮的方法，探索甘草黃酮合成的調(diào)控機理，主要圍繞烏拉爾甘草細胞懸浮培養(yǎng)體系的建立、懸浮系非結構動力學分析、甘草黃酮有效提取方法的建立、查爾酮異構酶及其啟動子的克隆等方面開展了較為系統(tǒng)的研

2、究，取得了以下的成果：
　?。?）在建立了穩(wěn)定的烏拉爾甘草細胞懸浮培養(yǎng)體系的基礎上，探討了懸浮培養(yǎng)過程中細胞生長、基質(zhì)消耗及產(chǎn)物合成的動態(tài)變化，建立了Logistic方程為基礎的甘草細胞生長、基質(zhì)消耗與黃酮合成的動力學模型，并采用Origin Pro8.0軟件對實驗數(shù)據(jù)進行擬合，模型擬合值和試驗值吻合較好，表明本實驗所建立的動力學模型能很好地符合實際的培養(yǎng)過程。
　?。?）采用雙因素無重復試驗篩選了烏拉爾甘草懸浮細胞黃酮類化

3、合物提取最佳工藝。試驗結果表明以70%的乙醇作為提取劑，在料液比1:10的條件下進行超聲提取，甘草中黃酮類化合物能得到充分分離。
　?。?）克隆出甘草細胞中chi基因的cDNA序列，序列包含657 bp的完整開放閱讀框，共編碼218個氨基酸，核酸、蛋白序列比對結果顯示，甘草CHI蛋白序列與大豆和菜豆相似度達97%和93%，分子量和等電點分別為23.18 kD和6.23，其三級結構呈一個倒置型花束，典型有功能的CHI蛋白的空間結構。