1、生物樣品一般是指生物組織、細胞、體液、體內代謝物、內源性物質及生物標志物等。生物樣品復雜多樣，微量待測物質存在于大量介質中，并且介質中存在大量干擾物質，給樣品分析帶來極大困難。生物樣品的特點是被測物質樣品量少，濃度低，容易失活，基質復雜等。常規(guī)分析中的樣品數目一般較多。因此，建立一種簡單快速、靈敏度高、樣品消耗少的生物樣品分析方法勢在必行。
　　毛細管電泳具有高效快速、設備簡單、試劑消耗量少的特點，成為當前分離分析科學中活躍的研究

2、領域之一，在生物樣品分析中有其它方法無可比擬的優(yōu)勢。但因其進樣量少導致檢測靈敏度低，從而限制了其在痕量物質檢測中的廣泛應用。為了提高方法的檢測靈敏度，使毛細管電泳技術能夠適用于分析更多復雜樣品中的痕量組分，發(fā)展了樣品在線富集技術。在線富集技術無需增加其它儀器，富集是在毛細管內實現的，具有靈敏度高、成本低廉、操作簡單、易于自動化等優(yōu)點，近年來越來越受分析領域研究者的青睞。
　　本論文在前人工作的基礎上，研究了毛細管電泳富集法在生物樣

3、品分析中的應用，主要開展了如下具有創(chuàng)新性的工作:
　　1.根據氨基酸的兩性性質和弱酸堿性，聯用動態(tài)pH聯接和掃集富集技術，并采用紫外間接檢測法，建立了微量酸性氨基酸的含量測定新方法，探討了新方法的適用性，測定了復合氨基酸注射液和人血清中酸性氨基酸的含量。
　　2.利用環(huán)糊精形成包合物的性質，在樣品基質中加入γ-環(huán)糊精以增強待測組分與膠束的親和性，從而增強掃集效果，同時將場強放大技術與掃集技術結合，建立了測定生物樣品中痕量恩諾

4、沙星和環(huán)丙沙星的毛細管電泳分析新方法，并探討了其在六種動物源性食品（牛奶、奶粉、雞肉、豬肉、豬肝、豬腎）中的應用。
　　根據內容，本論文共分為四章。
　　第一章:簡述了生物樣品的特點、生物樣品的分析方法及前處理方法。綜述了毛細管電泳常用的富集方法的原理，各方法的優(yōu)缺點，以及在生物樣品分析中的應用。
　　第二章:選擇苯甲酸作為紫外探針，建立了一種靈敏度高、簡單快速的檢測復雜基質中痕量酸性氨基酸—谷氨酸和天冬氨酸的定量分析

5、方法，并對體系的性能進行了方法學驗證。新方法聯用了動態(tài)pH聯接和掃集技術，以β-環(huán)糊精為絡合劑進行掃集。采用總長度為50 cm、有效長度為42 cm的未涂層的石英毛細管作為富集和分離毛細管。緩沖體系由10mM三羥甲基氨基甲烷、8mM苯甲酸和10 mMβ-環(huán)糊精組成(pH7.5)。樣品基質為3mM的磷酸(pH2.5)。該方法富集作用強大，大大提高了檢測靈敏度。與常規(guī)方法相比，該法對谷氨酸和天冬氨酸的靈敏度分別提高30倍和55倍，檢測限分別

6、為0.061μg/mL和0.032μg/mL。線性范圍均為0.1-8.0μg/mL，峰面積與濃度間的線性良好，相關系數(r)均大于0.999。為了進一步增大血清中天冬氨酸與干擾雜質峰的分離度，在樣品基質中加入6％(v/v)的甲醇，靈敏度略有降低，對谷氨酸和天冬氨酸的檢測限分別為0.125μg/mL和0.057μg/mL。該法成功測定了去蛋白后的人血清樣品中的谷氨酸和天冬氨酸的含量，回收率分別為82％和87％，相對標準偏差分別為1.9％和

7、2.0％。實驗結果表明，動態(tài)pH聯接-掃集與間接紫外結合的方法是測定谷氨酸和天冬氨酸含量的簡單快速的在線富集方法。該法無需繁瑣的衍生化步驟，將分析時間縮短至10 min以內，也不需要像質譜檢測器那樣昂貴的檢測器，適用于常規(guī)生物樣品分析。
　　第三章:本章分為兩部分。
　　第一部分，采用總長度為65 cm、有效長度為57 cm的未涂層的石英毛細管作為富集和分離毛細管，建立了同時測定微量恩諾沙星和環(huán)丙沙星含量的毛細管電泳富集新方

8、法，并對體系作了方法學驗證。該技術是將場強放大富集技術與掃集富集技術結合起來建立的。為了增強待測組分與膠束的親和性，以增強掃集富集效果，在樣品基質中加入了γ-環(huán)糊精。背景緩沖液由20 mM三羥甲基氨基甲烷和80 mM脫氧膽酸鈉組成，pH為8.8。樣品基質由300 mM三羥甲基氨基甲烷和5mMγ-環(huán)糊精組成，pH為10.0。進樣時間為300 s，電壓為15 kV，檢測波長為270 nm。在最佳實驗條件下，與常規(guī)進樣分析（樣品基質為背景緩沖

9、液，進樣時間為5s）相比，新方法對恩諾沙星和環(huán)丙沙星的檢測靈敏度分別提高了374倍和406倍，檢測限分別為1.87 ng/mL和2.21 ng/mL。恩諾沙星和環(huán)丙沙星的峰面積與濃度之間具有良好的線性關系，相關系數(r)分別為0.9998和0.9999。新方法重復性高，恩諾沙星和環(huán)丙沙星的峰面積的日內相對標準偏差分別為1.46％和2.40％，日間相對標準偏差分別為2.46％和2.95％。
　　第二部分，為了使新建的方法適于測定具有

10、復雜基質的生物樣品中的微量恩諾沙星和環(huán)丙沙星，對進樣時間和脫氧膽酸鈉濃度做了調整，即背景緩沖液由20 mM三羥甲基氨基甲烷和120mM脫氧膽酸鈉組成，pH為8.8。進樣時間為240 s。在最佳實驗條件下，與常規(guī)進樣分析(樣品基質為背景緩沖液，進樣時間為5s)相比，新方法對恩諾沙星和環(huán)丙沙星的檢測靈敏度分別提高了124倍和122倍，檢測限分別為5.70 ng/mL和7.39 ng/mL。恩諾沙星和環(huán)丙沙星的峰面積與濃度之間線性相關系數(r

11、)分別為0.9994和0.9997。新方法重復性高，恩諾沙星和環(huán)丙沙星的峰面積的日內相對標準偏差分別為1.99％和2.40％，日間相對標準偏差分別為2.44％和2.14％。該方法成功應用于牛奶、奶粉、雞肉、豬肉、豬肝和豬腎等生物樣品中恩諾沙星和環(huán)丙沙星的檢測，回收率在85％-102％之間，回收率的相對標準偏差在0.1％-4.4％之間。新方法的檢測限遠低于有關部門規(guī)定的恩諾沙星和環(huán)丙沙星在動物源性食品中的最大殘留量，并且所用試劑價廉易得，

12、樣品前處理簡單，可用于常規(guī)檢測動物源性食品中的藥物殘留。
　　第四章:總結了本論文的主要結論和展望。
　　本論文研究結果表明，毛細管電泳在線富集方法是有效且經濟的提高毛細管電泳檢測靈敏度的方法。它不僅操作簡單、成本低廉，而且在不延長分析時間的同時可使檢測靈敏度顯著提高。在用于生物樣品分析時，對樣品前處理要求無高效液相色譜嚴格，可大大縮短分析時間。將毛細管電泳在線富集法用于分析生物樣品中的微量成分，對于擴展毛細管電泳在微量物質