1、聚合酶鏈式反應(PCR)在分子生物學研究領域已經(jīng)得到了廣泛的應用，聚合酶鏈反應(PCR)是現(xiàn)代生物學和醫(yī)學領域最常用的分子生物學技術之一，可以把一個單拷貝的目的DNA片段擴增到幾百萬倍。但在實際運用中，PCR技術存在一定的局限，例如對復雜體系的擴增會出現(xiàn)非特異性產(chǎn)物擴增以及擴增效率等問題。因此，尋找可以提高PCR特異性和效率的添加劑具有很大的潛力和發(fā)展前景。
　　 實驗中，我們以283bp的λDNA的再擴增PCR體系和非特異性擴

2、增體系為測試體系，對樹狀大分子包裹的金納米顆粒對PCR的作用進行研究。本實驗采用第五代樹狀大分子納米金顆粒(Au DENPs)為研究對象，金原子與樹狀大分子的摩爾比為25∶1，50∶1，75∶1，100∶1，125∶1五種Au DENPs作為添加劑。實驗證明，包裹有不同濃度膠體金的樹狀大分子都能對PCR反應起到優(yōu)化作用，而且隨著膠體金濃度的增大，相應樹狀大分子的優(yōu)化作用增強，最優(yōu)濃度越來越低。
　　 據(jù)我們推斷，Au DENPs

3、的優(yōu)化機制是膠體金的加入使樹狀大分子的“硬度”增大，當樹狀大分子與PCR各組分相互作用時，由于其表面的有效反應基團增多，提高周圍PCR各組分有效反應濃度以及促使游離的聚合酶越來越傾向于與完全配對的引物和模板形成復合物的能力得到增強，從而增強反應的效率及特異性。
　　 在此，我們以聚乙烯亞胺修飾的不同表面電荷多壁碳納米管(CNT/PEI)為添加劑，探討了不同表面電勢對PCR優(yōu)化的影響。試驗結(jié)果表明再擴增體系的特異性和效率明顯受到聚

4、乙烯亞胺修飾的碳納米管的表面電荷的影響。即使?jié)舛葹?.39 mg/L時，表面修飾正電荷的碳納米管也能有效的優(yōu)化PCR;電中性的CNT/PEI.Ac不能優(yōu)化該體系;盡管帶負電荷的CNT/PEI.SAH可以優(yōu)化PCR,但是它的最優(yōu)濃度為630 mg/L，比CNT/PEI最優(yōu)濃度的103還要高。該實驗結(jié)果表明CNT/PEI表面的正電荷和CNT/PEI.SAH的表面負電荷與PCR反應組分之間的電荷作用可以提高PCR擴增的特異性和效率，碳納米管的