雌激素對(duì)成骨細(xì)胞小凹蛋白-1表達(dá)的影響及其作用.pdf_第1頁(yè)
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文檔簡(jiǎn)介

1、目的： 觀察雌激素對(duì)不同階段成骨細(xì)胞中caveolin-1（小凹蛋白-1）表達(dá)的影響，并研究caveolin-1在雌激素調(diào)節(jié)成骨細(xì)胞分化成熟過(guò)程中的作用。 方法： 將雌激素分別作用于增殖期（第2天）、分化期（第6天）、礦化期（第12天）的成骨細(xì)胞（MC3T3-E1）48小時(shí)，采用westernb lotting方法觀察caveolin-1蛋白表達(dá)變化。對(duì)于分化期MC3T3-E1細(xì)胞，采用caveolin-1

2、真核表達(dá)質(zhì)粒Pcl-neo-cav-1上調(diào)caveolin-1表達(dá)后，觀察其對(duì)雌激素調(diào)節(jié)成骨細(xì)胞代謝作用的影響，觀察指標(biāo)分別為細(xì)胞裂解液ALP活性（PNPP法）、培養(yǎng)上清骨鈣素濃度（ELISA）以及成骨細(xì)胞特異性分化因子cbfa-1mRNA表達(dá)水平（RT-PCR）。最后，通過(guò)檢測(cè)細(xì)胞培養(yǎng)基一氧化氮水平，探索caveolin-1作用機(jī)制。 結(jié)果： 1.雌激素可劑量依賴(lài)下調(diào)分化期MC3T3-E1細(xì)胞caveolin-1蛋

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