XPD基因對SMMC-7721細胞增殖、遷移及PTEN基因表達的影響.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的：探討人剪切修復基因XPD（XerodermapigmentosumD）轉染至人肝癌SMMC-7721細胞后，對腫瘤細胞增殖、遷移、凋亡以及PTEN基因表達的影響。
　　方法：本實驗使用脂質體LipofectamineTM2000作為載體介質，用瞬時轉染法將空載質粒pEGFP-N2和重組質粒pEGFP-N2-XPD轉染入人肝癌細胞株SMMC-7721細胞內。實驗分為四個組：空白對照組、脂質體組、pEGFP-N2組、pEGFP-

2、N2-XPD組。通過熒光顯微鏡觀察綠色熒光蛋白的表達；蛋白印跡（Westernblotting）法檢測腫瘤細胞中XPD和PTEN蛋白的表達水平；MTT法檢測腫瘤細胞的增殖水平；Transwell實驗觀測腫瘤細胞遷移能力的改變；流式細胞儀檢測腫瘤細胞的凋亡水平。
　　結果：轉染空載質粒pEGFP-N2和重組質粒pEGFP-N2-XPD的人肝癌SMMC-7721細胞在熒光顯微鏡下均可見綠色熒光，表明轉染有效。pEGFP-N2-XPD組

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