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文檔簡介
1、傳統(tǒng)抗生素的毒副作用及其耐藥菌株的出現(xiàn),迫使人們尋找新型的抗微生物制劑。抗菌肽(ABP)是由動物、植物、昆蟲以及人體基因組編碼的具有抗生素樣活性的肽類物質(zhì)。它是機(jī)體免疫系統(tǒng)的重要成分,構(gòu)成宿主防御病源微生物入侵的第一道屏障。抗菌肽除了具有分子量小、熱穩(wěn)定性好、免疫原性較低等特點(diǎn),還由于其獨(dú)特的化學(xué)結(jié)構(gòu),能有效抑殺真菌、病毒、細(xì)菌、寄生蟲,而不易產(chǎn)生耐藥性,能選擇性殺滅腫瘤細(xì)胞,而對人畜毒副作用極小。 本研究根據(jù)GenBank中提
2、交的序列,以果蠅總RNA為模板,利用兩步法RT-PCR技術(shù),擴(kuò)增出兩端加入了酶切位點(diǎn)和保護(hù)堿基的攻擊素(AttacinC)基因,將接頭處理成粘性末端,可以與經(jīng)過BamHI及SalI酶切后的pET-30a(+)表達(dá)載體正確連接。將AttacinC基因與原核表達(dá)載體pET-30a(+)重組,構(gòu)建重組原核表達(dá)載體pET-30a(+)/AnacinC,經(jīng)菌落PCR和質(zhì)粒PCR鑒定,證明目的基因已整合入原核表達(dá)載體pET-30a(+)中,挑選陽性
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