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1、抗菌肽是自然界中的廣泛存在的生物體先天免疫效應因子,因其具有廣譜抗菌、殺菌力強、非特異性殺菌、不易使病原體產(chǎn)生抗性等特點而倍受科學家的關(guān)注。本研究主要從事抗菌肽基因的合成與植物表達載體的構(gòu)建,為將來應用于甘蔗遺傳轉(zhuǎn)化做準備。本論文主要的內(nèi)容有: 1)設計引物利用PCR技術(shù)擴增得到抗菌肽基因片段并將其克隆進載體,測序結(jié)果表明PCR擴增得到的產(chǎn)物因存在缺失、倒置、突變、插入等現(xiàn)象而不能在下一步的實驗中加以利用; 2)將適合單
2、子葉植物遺傳轉(zhuǎn)化的ub i啟動子連接入克隆載體pUC19并兩端測序,證實本室保存的Ub i啟動子與GENBANK上發(fā)布的序列具有很高的同源性,可以用于植物表達載體構(gòu)建; 3)用甘蔗偏愛的密碼子設計了分泌型抗菌肽基因MS I-99并在其后設計了Nos終止子,在全基因合成得到該基因后在其前面連接上Ub i啟動子,將Ubi-MSI-Nos連接到質(zhì)粒pCAMB I 2301的多克隆位點上構(gòu)建得到植物表達載體; 4)進行了甘蔗愈傷
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