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1、本研究旨在研究高精料日糧飼喂對(duì)奶山羊肝臟中游離氨基酸重分配及乳產(chǎn)量和乳蛋白的影響與相關(guān)機(jī)制。研究包括以下三個(gè)方面的主要內(nèi)容:
1、高精料日糧對(duì)干奶期奶山羊肝臟中游離氨基酸重分配的影響
試驗(yàn)選用干奶期奶山羊6只,2×2拉丁方試驗(yàn)設(shè)計(jì)。前10d為適應(yīng)期,期間安裝瘤胃瘺管,并進(jìn)行肝臟多血管瘺手術(shù)。適應(yīng)期后,隨機(jī)分為2組,分別飼喂精粗比為40∶60(正常對(duì)照組)和60∶40(高精料組)的飼料,每期4周。每期試驗(yàn)結(jié)束,采集頸靜
2、脈、肝門靜脈和肝靜脈血液,取瘤胃液,并取肝臟組織。測(cè)定飼喂后0、1、2、4、6、8和10h瘤胃液pH值;檢測(cè)進(jìn)出肝臟血液和肝臟組織勻漿液中FAA的含量及外周血血液中LPS和MDA含量,SOD、CK、LDH、GPT和GOT酶活力,并檢測(cè)肝臟組織中CK、LDH、GPT和GOT的酶活力。結(jié)果表明:與正常對(duì)照組相比,高精料組奶山羊從肝門靜脈進(jìn)入肝臟的FAA含量增多,但經(jīng)肝靜脈出肝臟的FAA總量減少,且肝臟中儲(chǔ)存的FAA含量也減少;瘤胃pH降低,
3、并出現(xiàn)SARA;血液中LPS含量極顯著升高(P<0.01);MDA含量升高且SOD酶活力下降(P>0.05); CK酶活力升高(P>0.05)、LDH酶活力極顯著升高(P<0.01)、GPT和GOT酶活力均顯著升高(P<0.05);肝臟組織中CK、LDH、GPT和GOT酶活力均出現(xiàn)升高(P>0.05)。結(jié)果提示:飼喂高精料日糧,肝臟中AA發(fā)生了重分配,進(jìn)肝多,出肝少,其機(jī)制可能是在高精料日糧飼喂條件下,機(jī)體出現(xiàn)SARA,引起循環(huán)血液中L
4、PS含量增加,導(dǎo)致機(jī)體處于氧化應(yīng)激狀態(tài),肝臟受到一定程度的損傷,AA過多消耗有關(guān)。
2、高精料日糧對(duì)泌乳奶山羊肝臟中游離氨基酸重分配及乳蛋白的影響
試驗(yàn)選用泌乳期奶山羊6只,2×2拉丁方試驗(yàn)設(shè)計(jì)。前10d為適應(yīng)期,期間進(jìn)行肝門靜脈、肝靜脈和股動(dòng)脈血管瘺管手術(shù)。適應(yīng)期后,隨機(jī)分為2組,分別飼喂精粗比為40∶60(正常對(duì)照組)和60∶40(高精料組)的飼料,每期8周。每期試驗(yàn)結(jié)束后,統(tǒng)計(jì)乳產(chǎn)量,并取乳樣測(cè)定乳蛋白含量;通
5、過肝門靜脈、肝靜脈和股動(dòng)脈血管瘺取血,RP-HPLC法測(cè)定血漿中FAA含量;同時(shí)通過頸靜脈取血,測(cè)定外周血中 MDA含量,以及SOD、GPT、GOT、AKP、GT、LDH和CK酶活力。結(jié)果表明:與正常對(duì)照組相比,飼喂8周后,高精料組奶山羊乳產(chǎn)量下降,乳中乳蛋白含量顯著降低;高精料組奶山羊肝門靜脈血中14種AA含量均多于正常對(duì)照組,而肝靜脈血中除Asn、Gln和Ile含量略多于正常對(duì)照組外,其余AA含量均少于正常對(duì)照組,股動(dòng)脈血中除Tyr
6、和Trp略多于正常對(duì)照組外,其余AA含量均少于正常對(duì)照組;奶山羊外周血中抗氧化應(yīng)激指標(biāo)SOD酶活力顯著下降(P<0.05),應(yīng)激指標(biāo)MDA含量升高(P>0.05),GT酶活力極顯著升高(P<0.01);GPT和GOP酶活力升高或極顯著升高(P>0.05,P<0.01);CK和LDH酶活力顯著升高(P<0.05)。結(jié)果表明,長期飼喂高精料日糧,機(jī)體處于氧化應(yīng)激狀態(tài),肝臟中FAA分配與重分配發(fā)生改變,F(xiàn)AA在肝臟中消耗量增大,進(jìn)入乳腺FAA
7、減少,乳蛋白含量降低。高精料飼喂,對(duì)泌乳期奶山羊乳蛋白合成和機(jī)體健康都是不利的。
3、高精料日糧飼喂引起乳產(chǎn)量和乳蛋白下降的內(nèi)分泌機(jī)制及其信號(hào)通路
試驗(yàn)設(shè)計(jì)同第2部分,每期試驗(yàn)結(jié)束,采集乳樣和頸靜脈血液,并采集肝臟和乳腺組織。檢測(cè)外周血中GH和IGF-1含量;統(tǒng)計(jì)乳產(chǎn)量并檢測(cè)乳蛋白和乳糖含量;對(duì)肝臟組織中GHR、JAK2和STAT5 mRNA表達(dá)水平,以及乳腺組織中IGF-1R mRNA表達(dá)水平進(jìn)行檢測(cè)。結(jié)果表明:在
8、高精料日糧的飼喂條件下,奶山羊外周血中GH含量下降(P>0.05)、IGF-1含量顯著下降(P<0.05);肝臟組織中GHR、JAK2和STAT5mRNA表達(dá)水平均出現(xiàn)下調(diào),其中JAK2 mRNA表達(dá)水平顯著下調(diào)(P<0.05);乳腺組織中,IGF-1R mRNA表達(dá)水平顯著下調(diào)(P<0.05)。結(jié)果提示:長期飼喂高精料日糧,導(dǎo)致奶山羊體內(nèi)內(nèi)源性GH分泌量降低,引起肝臟組織中JAK2-STAT5信號(hào)通路表達(dá)受到抑制,一方面直接抑制乳蛋白
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