1、近年來(lái)腫瘤發(fā)病率有呈上升的趨勢(shì)，由于傳統(tǒng)治療方法有風(fēng)險(xiǎn)大、毒副作用強(qiáng)等弊端，人們積極尋找更安全有效的治療手段。光動(dòng)力治療具有非侵入性、可多次安全重復(fù)使用等優(yōu)點(diǎn)。抗腫瘤血管生成治療以腫瘤血管內(nèi)皮細(xì)胞為作用靶點(diǎn)，系統(tǒng)毒性較小，不易產(chǎn)生耐藥性，與腫瘤化學(xué)藥物聯(lián)用可以起到協(xié)同效應(yīng)。納米顆粒輸送系統(tǒng)基于生物體EPR效應(yīng)或表面修飾靶向基團(tuán)后，可被動(dòng)或主動(dòng)靶向到達(dá)腫瘤組織，起到良好的抗腫瘤作用。
　　本文旨在合成一種富勒烯-環(huán)糊精/沙利度胺包合

2、物，利用包合物中的環(huán)糊精部分增強(qiáng)體系的生物相容性，并包合藥物，利用富勒烯結(jié)構(gòu)光動(dòng)力作用生成ROS殺死腫瘤細(xì)胞（腫瘤實(shí)質(zhì)），利用沙利度胺藥物作用殺死腫瘤血管內(nèi)皮細(xì)胞（腫瘤間質(zhì)），從而起到協(xié)同作用。采用該納米藥物載體，其潛在優(yōu)勢(shì)在于:①生物相容性好;②提高藥物溶解度，載藥率高;③具有被動(dòng)靶向性。
　　本文合成了環(huán)糊精-富勒烯/沙利度胺包合物，在理化表征的基礎(chǔ)上進(jìn)行了生物學(xué)應(yīng)用探討。方法與結(jié)果如下:(1)利用乙二胺加成到富勒烯碳籠上得到

3、氨基化富勒烯衍生物，馬來(lái)酸酐與β-環(huán)糊精反應(yīng)得到羧基化環(huán)糊精，將這兩者酰胺化偶聯(lián)，最后利用環(huán)糊精空腔包合沙利度胺藥物。通過(guò)紅外光譜、質(zhì)譜、紫外光譜、核磁共振等技術(shù)手段對(duì)材料結(jié)構(gòu)表征分析。結(jié)果表明成功合成了富勒烯與β-環(huán)糊精摩爾比為1∶1的復(fù)合物，并包合沙利度胺，載藥率為7.34％，該包合物具有較好的藥物緩釋能力。(2) Hela細(xì)胞與一系列梯度濃度包合物共培養(yǎng)并光照處理后:采用MTT法檢測(cè)細(xì)胞活性，載體材料無(wú)光照條件下生物相容性很好，光

4、照處理下會(huì)發(fā)生光動(dòng)力反應(yīng)，而包合物無(wú)光照條件下釋放藥物導(dǎo)致細(xì)胞毒性，光照處理下有協(xié)同效應(yīng)對(duì)細(xì)胞毒性更強(qiáng);添加不同的ROS抑制劑，用MTT法比較細(xì)胞活性的改變，L-組氨酸和NAC（兩種單線(xiàn)態(tài)氧清除劑）的添加顯著提高了細(xì)胞活性，鑒別出光動(dòng)力反應(yīng)是TypeⅡ型為主;用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)ROS積累量，再進(jìn)一步由ABDA檢測(cè)單線(xiàn)態(tài)氧產(chǎn)率;用鈣黃綠素/PI雙染法做活細(xì)胞/死細(xì)胞雙重染色，觀(guān)察細(xì)胞死亡情形;通過(guò)Fura-2/AM探針檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)Ca2

5、+濃度。結(jié)果顯示富勒烯-環(huán)糊精/沙利度胺包合物光照處理下會(huì)發(fā)生光動(dòng)力作用，使細(xì)胞活性降低，ROS升高，Ca2+濃度升高。(3)通過(guò)MTT實(shí)驗(yàn)、細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)、Transwell侵襲實(shí)驗(yàn)和體外小管形成實(shí)驗(yàn)來(lái)探討包合物光照處理對(duì)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞的增殖、遷移、小管形成的抑制作用。結(jié)果表明包合物的藥物抗血管生成作用和光動(dòng)力效應(yīng)協(xié)同作用，明顯抑制了HUVEC細(xì)胞體外血管生成。綜上所述，本課題合成了一種新的環(huán)糊精-富勒烯/沙利度胺包合物，具有光動(dòng)力效