1、為了提高納豆中的蛋白酶活力，以納豆芽孢桿菌為菌種，對(duì)鷹嘴豆納豆液態(tài)發(fā)酵進(jìn)行優(yōu)化。將蛋白酶活力作為指標(biāo)，采用Plackett-Burman法篩選出三個(gè)對(duì)蛋白酶活力影響最大的因素:裝液量、轉(zhuǎn)速和鷹嘴豆粉添加量;通過(guò)響應(yīng)面法優(yōu)化鷹嘴豆納豆液態(tài)發(fā)酵的培養(yǎng)基和培養(yǎng)條件，所建立的二次回歸方程擬合度良好，對(duì)提高蛋白酶活力影響顯著(p=0.0006)，所得最佳培養(yǎng)基為鷹嘴豆粉添加量5.9％，豆粕粉1.0％，葡萄糖0.6％，氯化鈉0.5％，最佳發(fā)酵條件為

2、:轉(zhuǎn)速250r/min，裝液量76/500mL，溫度37℃，發(fā)酵時(shí)間48h。該條件下發(fā)酵所得蛋白酶活力達(dá)3558.0±1.5U/mL，相對(duì)于對(duì)照培養(yǎng)基的2491.4±2.8U/mL提高了42.8％，而且通過(guò)纖維蛋白平板法的驗(yàn)證，納豆激酶溶解面積提高了108.6％。結(jié)果表明，優(yōu)化后的培養(yǎng)基組成和發(fā)酵條件能有效提高蛋白酶活力。
　　利用復(fù)合誘變的手段，探究了超高壓和紫外誘變對(duì)納豆芽孢桿菌的適宜劑量和強(qiáng)度，選育蛋白酶產(chǎn)量高、活力強(qiáng)的優(yōu)質(zhì)

3、復(fù)合誘變納豆芽孢桿菌。確定超高壓誘變條件250MPa、5min，紫外誘變條件15W、20cm、照射50s。單一誘變與復(fù)合誘變菌株的延滯期顯著縮短，提前進(jìn)入對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期。超高壓-紫外復(fù)合誘變菌株P(guān)-UV-4在蛋白酶活力的提高上尤為明顯，是出發(fā)菌株的2.44±0.12倍、是超高壓?jiǎn)我徽T變菌株的1.32±0.07倍。在生物量方面，P-UV-4最低，但是其比蛋白酶活力是出發(fā)菌株的14.23±0.71倍、是超高壓誘變菌株的3倍左右。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，復(fù)

4、合誘變更適合該菌株，且正向突變程度大，復(fù)合誘變是誘變育種的優(yōu)良思路。
　　對(duì)比優(yōu)化前后的培養(yǎng)基、出發(fā)菌株和誘變菌株，結(jié)果表明，菌株P(guān)-UV-4在優(yōu)化培養(yǎng)基中適應(yīng)性好，最高蛋白酶活可達(dá)4227.3±211.4U/mL，最高菌數(shù)為4.89×109CFU/mL。
　　通過(guò)Origin9.0軟件對(duì)發(fā)酵動(dòng)力學(xué)曲線(xiàn)分析數(shù)據(jù)并進(jìn)行擬合，基于修正Logistic方程得到菌體生長(zhǎng)模型為y=-9.06029/1+(x/0.64828)1.426