疏水性連續(xù)變化金納米系列的制備以及與蛋白質(zhì)相互作用的初步研究.pdf_第1頁(yè)
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1、納米材料是指三維空間尺度至少有一維處于納米尺度的材料,其獨(dú)特的物理化學(xué)性質(zhì)引起了人們的廣泛關(guān)注,其中以生物醫(yī)學(xué)應(yīng)用為目標(biāo)的探索性研究正在迅速發(fā)展成一個(gè)新的研究領(lǐng)域。金納米顆粒是目前研究較多、應(yīng)用較為廣泛的納米材料,通過(guò)在納米材料表面引入功能化化學(xué)基團(tuán),納米材料的水溶性和生物相容性得到改善,從而為其在生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域的應(yīng)用奠定了基礎(chǔ)。作為生命物質(zhì)的基礎(chǔ),蛋白質(zhì)是一類(lèi)極為重要的生物大分子。當(dāng)納米材料進(jìn)入生理環(huán)境(如血液、組織液和細(xì)胞質(zhì))時(shí),納米

2、材料不可避免地會(huì)與蛋白質(zhì)發(fā)生相互作用。兩者相互作用的結(jié)果不僅有可能影響蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)和功能,還將直接影響納米材料在體內(nèi)生理環(huán)境下的動(dòng)力學(xué)性質(zhì)和生物活性?,F(xiàn)有研究表明,它們之間的相互作用與納米顆粒的形狀、結(jié)構(gòu)、尺寸、表面化學(xué)以及蛋白質(zhì)的性質(zhì)有關(guān)。但是,在研究過(guò)程中由于納米顆粒表面所修飾基團(tuán)的多樣性,通常無(wú)法保證單一性質(zhì)的變化。盡管人們關(guān)注某一特定性質(zhì)的影響作用,但結(jié)果可能是表面多種性質(zhì)效應(yīng)產(chǎn)生影響的疊加。因此,建立各自單一表面性質(zhì)連續(xù)變化的

3、納米材料庫(kù),深入探討各種性質(zhì)對(duì)納米顆粒與蛋白質(zhì)之間相互作用的影響,對(duì)納米醫(yī)學(xué)和納米毒理學(xué)的發(fā)展至關(guān)重要。
   本文主要分為兩部分研究?jī)?nèi)容:
   第一部分,是建立一個(gè)表面疏水性連續(xù)變化的金納米系列。首先設(shè)計(jì)并合成了兩種疏水性差異較大的配位體,通過(guò)調(diào)整兩種配位體在金納米顆粒表面的相對(duì)比例,利用硼氫化鈉還原法合成出一個(gè)表面疏水性連續(xù)變化的金納米系列;其次,利用TEM、DLS、Zeta電位對(duì)金納米陣列進(jìn)行分析表征;通過(guò)碘切法

4、,利用HPLC-MS對(duì)金納米表面連接的兩種基團(tuán)進(jìn)行定量分析;同時(shí),利用正辛醇-水分配系數(shù)(logP)值,對(duì)這個(gè)金納米系列的疏水性進(jìn)行了定量表征分析。
   綜合分析第一部分實(shí)驗(yàn)結(jié)果得到以下結(jié)論:合成的七種金納米粒子的粒徑均在5-8nm之間,且表面Zeta電位保持在-10mV到-20mV之間。金納米表面基團(tuán)分子上載量的定量分析顯示,隨著金納米粒子親水性的增加,疏水性基團(tuán)的量逐漸減少,親水性基團(tuán)的量逐漸增加。同時(shí),兩種基團(tuán)的總量大致

5、保持一致。根據(jù)測(cè)定的正辛醇-水分配系數(shù)logP值結(jié)果顯示,七種金納米顆粒從GNP12到GNP18,它們的疏水性呈梯度下降,親水性逐漸增強(qiáng)。
   本文第二部分,是利用穩(wěn)態(tài)熒光光譜研究了五個(gè)單一表面性質(zhì)(包括表面電荷密度、親疏水性、氫鍵、π-π共軛和空間立體化學(xué))的金納米系列與牛血清白蛋白(BSA)之間的相互作用,探討納米粒子與蛋白相互作用與納米材料的表面性質(zhì)存在的相關(guān)性。
   綜合分析第二部分實(shí)驗(yàn)結(jié)果得到以下結(jié)論:五種

6、單一表面化學(xué)性質(zhì)連續(xù)變化的金納米系列與BSA之間的相互作用均屬于靜態(tài)淬滅機(jī)制并且對(duì)BSA的結(jié)構(gòu)構(gòu)象不產(chǎn)生影響;金納米表面電荷密度越大越有利于它與BSA的結(jié)合;親水性的金納米與BSA的結(jié)合更強(qiáng);當(dāng)金納米表面具有一定量含π鍵的苯環(huán)時(shí),有利于提高金納米與BSA的結(jié)合能力,但過(guò)多的π鍵會(huì)抑制金納米與BSA之間的結(jié)合;增加金納米表面的氫鍵受體或供體的量,會(huì)提高其對(duì)BSA的結(jié)合能力;改變金納米表面基團(tuán)的立體化學(xué)性質(zhì)對(duì)金納米與BSA之間的相互作用沒(méi)有

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