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1、使用直接糖類(lèi)物質(zhì)做碳源培養(yǎng)微生物,不僅成本高,還存在著與人爭(zhēng)糧的問(wèn)題。將纖維素轉(zhuǎn)化為小分子糖進(jìn)而培養(yǎng)微生物生產(chǎn)具有高附加值的產(chǎn)品可以達(dá)到資源充分利用。黑曲霉是一種產(chǎn)酶比較豐富的菌種,可以產(chǎn)纖維素酶、β-糖苷酶、葡萄糖異構(gòu)酶、α-淀粉酶等,并且它不但可以既利用纖維素水解轉(zhuǎn)化得到的六碳糖,還可以利用其中的五碳糖,可以達(dá)到碳源的一種充分利用。所產(chǎn)的葡萄糖異構(gòu)酶固定化于黑曲霉細(xì)胞中,可以達(dá)到一種復(fù)配酶的效果。葡萄糖異構(gòu)酶與α-淀粉酶可以應(yīng)用于利
2、用淀粉生產(chǎn)果葡糖漿中去,還可以與纖維素酶、β-糖苷酶協(xié)同處理纖維素,可以將由纖維素水解產(chǎn)生的木糖轉(zhuǎn)化為產(chǎn)乙醇微生物代謝途徑中可利用的木酮糖,提高利用率,降低酶的成本。
本文對(duì)黑曲霉產(chǎn)葡萄糖異構(gòu)酶通過(guò)均勻設(shè)計(jì)和響應(yīng)面設(shè)計(jì)對(duì)培養(yǎng)條件進(jìn)行了優(yōu)化,優(yōu)化后的培養(yǎng)基為玉米漿粉2%,Glu1.6%,蔗糖0.8%,(NH4)2SO40.6%,MgSO40.08%,搖瓶發(fā)酵產(chǎn)酶可達(dá)到32.5U/mL,放大培養(yǎng)其產(chǎn)酶能力在5L發(fā)酵水平可達(dá)到每
3、毫升發(fā)酵液530U。進(jìn)而研究了黑曲霉利用五碳糖混合發(fā)酵的情況,在葡萄糖與木糖比例為4∶1的時(shí)候發(fā)酵效果最好。在利用玉米秸稈水解液進(jìn)行分步糖化發(fā)酵時(shí),250mL搖瓶發(fā)酵酶活可達(dá)34.3U/mL,在利用同步糖化發(fā)酵時(shí),酶活可達(dá)72.9U/mL。對(duì)柳枝稷、荻、蘆竹、玉米秸稈、狼尾草這五種不同的纖維素原料分別進(jìn)行發(fā)酵,并對(duì)發(fā)酵產(chǎn)酶的效果進(jìn)行比較,這5種原料中,使用秸稈作為原料的發(fā)酵產(chǎn)酶效果最好,酶活為72.9U/mL,而荻的發(fā)酵效果最差,酶活為
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