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文檔簡介
1、目的:
通過檢測原發(fā)免疫性血小板減少癥(ITP)患者及正常人的外周血血漿骨橋蛋白(OPN)含量,檢測有無OPN參與的情況下外周血單個核細胞的增殖情況,及PBMC細胞培養(yǎng)上清液中IL—17及IFN—γ的表達情況。進一步探討OPN在ITP發(fā)病機制中的作用。
方法:
收集40例健康成年人外周靜脈血5ml作為對照組,收集40例ITP患者治療前及治療后外周靜脈血各5ml作為實驗組和緩解組。將收集到的標本離心后收集血漿
2、,用骨橋蛋白ELISA酶聯(lián)免疫試劑盒測量標本中OPN含量,觀察實驗組、對照組、緩解組OPN的表達情況。從收集到的血液標本中提取PBMC細胞,在有或無OPN參與的情況下進行PBMC細胞孵育,用抗人CD3單克隆抗體及CD28單克隆抗體共同刺激外周血單個核細胞增殖,用CCK—8 ELISA酶聯(lián)免疫試劑盒測量細胞增殖程度,觀察在有或無OPN參與的情況下實驗組與對照組、對照組與緩解組的細胞增殖情況。用人 IL—17、人IFN—γ ELISA酶聯(lián)免
3、疫試劑盒測量細胞培養(yǎng)上清液中IL—17、IFN—γ的表達情況,觀察在有或無OPN參與的情況下實驗組與對照組、對照組與緩解組IL—17、IFN—γ的表達情況。采用spss18.0軟件包進行統(tǒng)計學分析。
結(jié)果:
?。?)實驗組血漿OPN水平高于對照組血漿OPN水平(P<0.05),緩解組血漿OPN水平與實驗組比較呈下降趨勢(P<0.05),差異有統(tǒng)計學意義;病例組的血小板計數(shù)和OPN表達呈負相關(guān)(R=-0.555,P<0.
4、05),差異有統(tǒng)計學意義。(2)分別對病例組、對照組、緩解組的PBMC進行培養(yǎng),在有OPN參與的情況下,各組PBMC細胞增殖情況均高于無OPN參與的情況(P<0.05),差異有統(tǒng)計學意義。(3)分別對病例組、對照組、緩解組PBMC細胞培養(yǎng)上清液中的IFN-γ及IL—17進行測量,在有OPN參與或無OPN參與的情況下,病例組IFN-γ的表達情況均高于對照組,緩解組IFN-γ的表達水平呈下降趨勢(P<0.05),差異有統(tǒng)計學意義;對各組IL
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