1、本文主要從以下幾方面進(jìn)行了論述。
　　第一部分 血小板膜糖蛋白唾液酸化在原發(fā)免疫性血小板減少癥中的表達(dá)和臨床意義
　　目的:探討血小板膜糖蛋白唾液酸化在原發(fā)免疫性血小板減少癥(ITP)發(fā)病機(jī)制中的作用。
　　方法:應(yīng)用流式細(xì)胞儀檢測(cè)43例初治成人ITP患者治療前后(其中包括15例大劑量地塞米松(HD-DXM)沖擊治療有效的ITP患者)和21例健康對(duì)照者血漿中血小板膜表面α2,3-唾液酸(α2,3-SA)和α2,6-唾液

2、酸(α2,6-SA)表達(dá)陽(yáng)性百分率;并運(yùn)用ELISA方法對(duì)血清中唾液酸含量及唾液酸酶活性和含量進(jìn)行測(cè)定。
　　結(jié)果: ITP患者血小板膜糖蛋白表面α2,6-SA表達(dá)水平降低(80.79±15.51)％,與正常對(duì)照組(98.73±2.43)％比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.001);α2,3-SA表達(dá)水平為(85.43±13.22)％,與正常對(duì)照組(87.56±7.23)％比較,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。15例HD-DXM有

3、效治療的ITP患者治療后α2,6-SA表達(dá)水平較治療前顯著升高(P<0.05);而α2,3-SA表達(dá)水平治療前后無(wú)差異(P>0.05)。ITP患者外周血清中SA含量、唾液酸酶含量及活性均顯著增高。SA濃度為(799.77±126.64)μl/ml,唾液酸酶濃度和活性為(5207.06±2306.29)pg/ml、(84.32±48.33)u/l,分別與正常對(duì)照組比較(565.80±131.06)μl/ml、(3851.91±1769.9

4、1)pg/ml、(60.53±31.79)u/l,均有顯著性差異(P<0.001,P<0.05,P<0.05)。15例HD-DXM有效治療的ITP患者SA及唾液酸酶含量、活性治療前后均無(wú)顯著差異(P均>0.05)。
　　結(jié)論:血小板膜糖蛋白唾液酸化可能參與了ITP的發(fā)病機(jī)制。
　　第二部分 MicroRNA在原發(fā)免疫性血小板減少癥中的表達(dá)及作用機(jī)制
　　目的:本研究通過(guò)分析ITP患者Treg細(xì)胞中miRNA基因表達(dá)譜,

5、探討miRNA是否參與了ITP中 Treg的免疫調(diào)控。
　　方法:選取常州市第一人民醫(yī)院收治的初診ITP患者20例及正常對(duì)照者15例,應(yīng)用免疫磁珠分選技術(shù)分選出ITP患者及正常對(duì)照者外周血Treg細(xì)胞;提取Treg細(xì)胞中總RNA,應(yīng)用miRBase18.0數(shù)據(jù)庫(kù)的芯片探針微陣列芯片技術(shù)及Volcano Plot filtering軟件分析miRNA表達(dá)譜,篩選出兩組Treg細(xì)胞中差異性表達(dá)的miRNA;應(yīng)用熒光實(shí)時(shí)定量PCR技術(shù)進(jìn)

6、一步驗(yàn)證ITP患者Treg細(xì)胞及治療前后血清中差異性表達(dá)的相關(guān)miRNA。
　　結(jié)果:與正常對(duì)照組相比,ITP患者Treg細(xì)胞內(nèi)有差異表達(dá)的miRNAs502個(gè),其中表達(dá)水平上調(diào)244個(gè),表達(dá)水平降低258個(gè);選擇表達(dá)降低的miR-155-5p、miR-146b-5p、miR-142-3p應(yīng)用熒光實(shí)時(shí)定量PCR進(jìn)一步驗(yàn)證,ITP患者Treg細(xì)胞中miR-155-5p、miR-146b-5p、miR-142-3p基因表達(dá)水平顯著降低

7、,結(jié)果有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.03;P<0.01;P<0.02);miR-155-5p、miR-146b-5p、miR-142-3p之間表達(dá)水平無(wú)明顯相關(guān)性。與正常對(duì)照相比ITP患者血清中miR-155-5p、miR-146b-5p、miR-142-3p基因表達(dá)水平無(wú)明顯差異。
　　結(jié)論:與正常對(duì)照者比較,ITP患者外周血Treg細(xì)胞內(nèi)存在差異性表達(dá)miRNAs;其中miR-155-5p、miR-146b-5p、miR-142-3p