1、通過(guò)皿內(nèi)對(duì)峙試驗(yàn)從242株供試內(nèi)生放線菌中篩選到辣椒疫霉病菌拮抗菌62株，抑菌帶寬度≥5mm的24株，占試驗(yàn)總菌株的10％，分別分離自黃瓜、牛蒡等9種植物的根部、莖部和葉片。用管碟法進(jìn)行抑菌活性復(fù)篩，發(fā)現(xiàn)其中6株的無(wú)菌濾液對(duì)辣椒疫霉病菌和大豆疫霉病菌的抑菌圈直徑≥20mm，其中g(shù)CLA4的抑菌活性最強(qiáng)。進(jìn)一步的研究結(jié)果表明，該菌株的無(wú)菌濾液能夠強(qiáng)烈抑制病菌孢子囊的形成及游動(dòng)孢子的釋放，原液對(duì)孢子囊形成及游動(dòng)孢子釋放的抑制率分別高達(dá)100

2、％和96.2％，稀釋50倍后的抑制率仍分別達(dá)95.3％和85.6％，并且對(duì)其菌絲生長(zhǎng)也有明顯的抑制作用，無(wú)菌濾液在15.0％稀釋終濃度下的菌絲生長(zhǎng)抑制率為87.2％。溫室盆栽試驗(yàn)結(jié)果表明，菌株gCLA4對(duì)苗期的辣椒疫病有較好防效。接種疫霉菌前48h、24h和0h以20ml/盆(2株/盆)澆灌gCLA4菌株無(wú)菌濾液于辣椒苗基部土壤，接種后7d調(diào)查病株率，顯示其防效分別達(dá)100％、92.3％和80.8％，而接種14d后分別為77.8％、55

3、.6％和36.1％。 對(duì)其搖瓶種子液培養(yǎng)基和發(fā)酵培養(yǎng)基以及發(fā)酵條件進(jìn)行了研究，初步篩選出適合內(nèi)生放線菌gCLA4產(chǎn)生抗菌物質(zhì)的種子液培養(yǎng)基為黃豆粉培養(yǎng)基，培養(yǎng)36h其生物量達(dá)最大；發(fā)酵液的培養(yǎng)基最適配方為：1％葡萄糖、0.4％可溶性淀粉、0.2％甘油、2％黃豆粉、0.4％蛋白胨、0.6％(NH<,4>)SO<,4>、0.2％NaCl、0.03％MgSO<,4>·7H<,2>O、0.1％CaCO<,3>、0.02％KH<,2>PO

4、<,4>，初始pH為605～7.0。最適發(fā)酵培養(yǎng)條件為：接種量12％，裝液量50mL/250mL瓶，溫度28℃，轉(zhuǎn)速1.50r/min，培養(yǎng)時(shí)間96h。 內(nèi)生放線菌gCLA4發(fā)酵液的粗提物對(duì)辣椒疫霉菌孢子囊的形成，游動(dòng)孢子的釋放以及菌絲生長(zhǎng)均具有較強(qiáng)的抑制作用。當(dāng)粗提物濃度為6mg/mL時(shí)，對(duì)辣椒疫霉菌孢子囊形成，游動(dòng)孢子釋放的抑制率分別為95.0％和90.4％，對(duì)辣椒疫霉菌絲生長(zhǎng)的抑制率為95.6％。隨著粗提物濃度的降低其抑制