1、在水產(chǎn)品加工過程會(huì)產(chǎn)生大量的廢棄物,其中魚皮富含膠原蛋白(多肽)。明膠是膠原多肽經(jīng)溫和但不可逆的斷裂后生成的主要產(chǎn)物。本論文以鲴魚皮為原料,采用熱水抽提法制備鲴魚皮明膠,研究了鮰魚皮明膠的復(fù)合酶解工藝、鮰魚皮明膠多肽的體外抗氧化、體內(nèi)抗衰老活性和抗氧化穩(wěn)定性,為水產(chǎn)品加工廢棄物的綜合利用開辟出了一個(gè)新的途徑。主要結(jié)果如下:
　　 (1)將鮰魚皮經(jīng)過脫脂、酸堿前處理后用45℃熱水抽提6h,得到鮰魚皮明膠。采用胃蛋白酶、胰蛋白酶、堿

2、性蛋白酶、中性蛋白酶、木瓜蛋白酶將鮰魚皮明膠進(jìn)行酶解,根據(jù)酶解液對(duì)·OH的清除效果,確定了胰蛋白酶和胃蛋白酶作為水解明膠用酶。以水解液對(duì)·OH的清除率為指標(biāo),通過正交試驗(yàn)L9(34),確定了胰蛋白酶單獨(dú)水解鮰魚皮明膠的最佳酶解工藝:溫度40℃、pH7.5、酶與底物質(zhì)量濃度比([E]/[S])3.5/100、底物質(zhì)量濃度2.5g/100mL。在胰蛋白酶最適酶解工藝條件的基礎(chǔ)上,采用胰蛋白酶和胃蛋白酶進(jìn)行復(fù)合水解,得到最佳復(fù)合酶解工藝:先用

3、胰蛋白酶酶解3h,然后用胃蛋白酶酶解3h,此時(shí)得到的酶解液羥自由基清除率最高,達(dá)到47.38％。
　　 (2)對(duì)最佳復(fù)合酶解工藝條件下所制備的鲴魚皮明膠酶解液的體外抗氧化活性進(jìn)行了測定。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明酶解液對(duì)·OH、·O2-、DPPH·和H2O2均有較好的清除作用,還具有一定的還原能力,對(duì)Fe2+誘發(fā)的卵黃脂蛋白的過氧化有較好的抑制作用。總體而言,鮰魚皮明膠酶解液在不同抗氧化體系中都表現(xiàn)出一定的抗氧化效果,具有很好的開發(fā)利用前景。

4、
　　 (3)將鮰魚皮明膠酶解液進(jìn)行超濾,并對(duì)超濾各組分清除自由基的活性進(jìn)行測定,結(jié)果表明分子量1000Da以下組分清除自由基活性最高,將此部分液體收集用于下一步小鼠的體內(nèi)抗氧化試驗(yàn)。采用D-半乳糖誘導(dǎo)的衰老小鼠模型,對(duì)鮰魚皮明膠水解液的體內(nèi)抗衰老活性進(jìn)行了研究。對(duì)實(shí)驗(yàn)小鼠灌胃給藥不同濃度的鮰魚皮明膠多肽,飼養(yǎng)42天后,分別測定小鼠血清中MDA的含量,SOD的活力和小鼠腦組織、肝組織中MDA含量,SOD、GSH-Px的活力。實(shí)驗(yàn)

5、結(jié)果表明鮰魚皮明膠多肽可以顯著提高衰老小鼠血清SOD活力和腦組織、肝組織SOD、GSH-Px活力;降低衰老小鼠血清和肝組織、腦組織中MDA含量。同時(shí),鮰魚皮明膠多肽的抗衰老活性隨給藥劑量提高而增強(qiáng)。
　　 (4)對(duì)鮰魚皮明膠多肽的抗氧化穩(wěn)定性進(jìn)行了初步研究,實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明:鮰魚皮明膠多肽具有較強(qiáng)的耐熱性,加熱到100℃,活性仍保持在90％左右;在pH2-9的環(huán)境中清除自由基活性保持較好,其中pH2和pH3時(shí)活性保持率接近100％,