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![呋喃唑酮及其代謝物酶聯(lián)免疫檢測(cè)方法的研究.pdf_第1頁(yè)](https://static.zsdocx.com/FlexPaper/FileRoot/2019-3/14/18/d3d7b0ef-afef-46ff-85d4-eb872627d1a8/d3d7b0ef-afef-46ff-85d4-eb872627d1a81.gif)
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1、本論文對(duì)呋喃唑酮及其代謝物3-氨基-2-惡唑烷酮(AOZ)獸藥殘留的酶聯(lián)免疫檢測(cè)方法進(jìn)行了的研究。合成了針對(duì)呋喃嘩酮原藥和代謝物的衍生物3-(2-硝基苯亞甲基)-氨基-2-惡唑烷酮(NPAOZ)均具有高度類似性的半抗原3-[(4-羧基苯基)-甲基]氨基-2-惡唑烷酮(CPAOZ),用活性酯法和混合酸酐法連接蛋白作為免疫原,比較其免疫效果。
在間接酶聯(lián)免疫檢測(cè)方法中,異源包被原是將呋喃唑酮原藥的硝基還原成氨基后用戊二醛法連接
2、蛋白OVA獲得。由活性酯法連接的免疫原得到的血清對(duì)NPAOZ和呋喃唑酮均表現(xiàn)了良好的親和力,IC50分別為2.5μg/L和2.0μg/L,出限(IC15)分別為0.25μg/L和0.09μg/L。在直接酶聯(lián)免疫競(jìng)爭(zhēng)優(yōu)化中,抗體表現(xiàn)出更低的檢出限,IC15分別為0.02μg/L和0.05μg/L,相應(yīng)的IC50分別為2.1μg/L和2.8μg/L??贵w展現(xiàn)了良好的特異性,與其他的硝基呋喃原藥、相應(yīng)代謝物、結(jié)構(gòu)類似物均無(wú)交叉反應(yīng)。
3、 由于在體內(nèi)易分解的呋喃唑酮經(jīng)常被不合法的應(yīng)用于動(dòng)物養(yǎng)殖過(guò)程中,導(dǎo)致具有致癌、致突變性的代謝物AOZ殘留,本實(shí)驗(yàn)選取了動(dòng)物飼料和動(dòng)物組織分別作為呋喃唑酮和其代謝物AOZ研究對(duì)象,包括:雞飼料、豬肉、豬肝、豬腎、雞肉、雞肝、蝦。檢測(cè)方法較之前的方法靈敏性更高,方法在三個(gè)不同的添加濃度1,5,20μg/kg,雞飼料、豬肉、豬肝、豬腎、雞肉、雞肝、蝦的回收率在76%-109%之間,相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差4.7%-11%之間。
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