1、脂肪酸甲酯是重要的化工中間體，具有廣泛的應(yīng)用領(lǐng)域，如可用來(lái)合成多種表面活性劑；用作洗滌劑以及其他許多化學(xué)制品的原料；用作高級(jí)潤(rùn)滑油的添加劑、機(jī)械加工的切削油、冷卻液等。目前，脂肪酸甲酯最主要的作用就是作為生物柴油進(jìn)行開發(fā)，將脂肪酸或脂肪轉(zhuǎn)化為脂肪酸甲酯用作生物柴油可為潲水油等提供有效利用途徑，因而更具有重要的食品安全意義。脂肪酸甲酯一般通過(guò)動(dòng)植物油脂和甲醇的酯交換反應(yīng)獲得，根據(jù)催化劑性質(zhì)，可將脂肪酸甲酯的制備方法分為酸催化法、堿催化法和

2、酶催化法等。酶催化具有能耗低、產(chǎn)品回收簡(jiǎn)單、無(wú)污染等優(yōu)點(diǎn)，是最具潛力的制備方法之一。本文從降低生產(chǎn)成本、提高反應(yīng)效率著手，以菜籽油為原料，以凱泰脂肪酶為催化劑，研究了脂肪酸甲酯的酶法制備工藝，研究?jī)?nèi)容及結(jié)論如下：
　　 對(duì)游離酶催化酯交換反應(yīng)的條件進(jìn)行了研究。首先探討了反應(yīng)體系和甲醇添加方式，確定了反應(yīng)體系為乳化體系，甲醇分三次加入反應(yīng)體系中。其次以甲酯得率為指標(biāo)，通過(guò)單因素實(shí)驗(yàn)研究了水分含量、醇油摩爾比、反應(yīng)溫度、反應(yīng)時(shí)間、酶

3、用量等因素對(duì)酯交換反應(yīng)的影響，并在單因素實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)上選擇了水分含量、反應(yīng)溫度和醇油摩爾比等影響較顯著的三個(gè)因素，采用響應(yīng)面實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)和分析方法，進(jìn)一步對(duì)酶催化酯交換反應(yīng)條件進(jìn)行了優(yōu)化。結(jié)果表明，游離酶催化酯交換反應(yīng)的最適條件為：反應(yīng)時(shí)間16h、酶用量400IU/g，水分含量21.5％、反應(yīng)溫度41℃、醇油摩爾比4.75:1，在此工藝條件下，甲酯得率為84.02％。
　　 研究了凱泰脂肪酶的固定化。以酶的活力回收率為指標(biāo)，首先對(duì)大孔

4、樹脂D101、大孔樹脂AB-8、大孔樹脂X-5、硅藻土、殼聚糖、海藻酸鈉等固定化載體材料進(jìn)行了篩選，結(jié)果表明，海藻酸鈉是最合適的固定化載體。然后通過(guò)單因素實(shí)驗(yàn)和正交實(shí)驗(yàn)，對(duì)海藻酸鈉固定化脂肪酶的條件進(jìn)行了優(yōu)化，結(jié)果表明，海藻酸鈉固定化脂肪酶的最佳工藝條件為：海藻酸鈉濃度為1.00％，CaCl2濃度為12％，脂肪酶用量為200IU/g，注射器針頭外徑0.51mm。此條件下固定化脂肪酶時(shí)，酶活力回收率為74.36％。
　　 在乳化反

5、應(yīng)體系中，對(duì)固定化脂肪酶催化菜籽油與甲醇的酯交換反應(yīng)條件進(jìn)行了優(yōu)化。利用響應(yīng)面設(shè)計(jì)和分析方法對(duì)酯交換反應(yīng)條件進(jìn)行優(yōu)化的結(jié)果表明，固定化酶催化酯交換反應(yīng)的最佳工藝條件為：水分含量34％、反應(yīng)溫度44℃、醇油摩爾比7.6:1、反應(yīng)時(shí)間20h、固定化酶用量400IU/g。在此工藝條件下甲酯得率達(dá)到84.89％。固定化酶連續(xù)使用5次之后，甲酯得率仍能達(dá)到68.35％。GC-MS對(duì)所得樣品的分析結(jié)果表明，脂肪酸甲酯主要有棕櫚酸甲酯、硬脂酸甲酯、亞

6、油酸甲酯、油酸甲酯、芥酸甲酯，其中油酸甲酯含量最高。
　　 通過(guò)堿煉工藝對(duì)所得脂肪酸甲酯粗品進(jìn)行初步提純?？疾炝思訅A量和堿煉的初始溫度兩個(gè)因素對(duì)產(chǎn)品酸價(jià)的影響。結(jié)果表明當(dāng)加堿量為0.070g/g油、初始溫度60℃的條件下，產(chǎn)品酸價(jià)為0.45mgKOH/g油，達(dá)到了生物柴油.標(biāo)準(zhǔn)對(duì)酸價(jià)的規(guī)定。
　　 比較游離脂肪酶與固定化脂肪酶催化酯交換反應(yīng)，固定化酶對(duì)甲醇具有更好的耐受性；在酶活性相當(dāng)?shù)臈l件下，固定化酶能達(dá)到與游離酶相同