1、目的：構(gòu)建高通量組織微陣列/ 組織芯片(high-throtJghput tissuemicroarray/tissue chip)，檢測(cè)cathepsin D(組織蛋白酶D，Cath D)在膠質(zhì)瘤中的表達(dá)，并分析其臨床意義，探討組織蛋白酶D與膠質(zhì)瘤預(yù)后的關(guān)系。 方法：選取2004年1月至2005年12月在復(fù)旦大學(xué)附屬華山醫(yī)院神經(jīng)外科行手術(shù)治療膠質(zhì)瘤病理標(biāo)本300例，其中星形細(xì)胞腫瘤214例，室管膜細(xì)胞腫瘤37例，少枝膠質(zhì)細(xì)胞瘤

2、49例，制成組織芯片，應(yīng)用免疫組織化學(xué)方法及蛋白印跡法檢測(cè)Cath D在膠質(zhì)瘤中的表達(dá)，應(yīng)用卡方分析研究其表達(dá)的差異和意義。隨訪(fǎng)53例WHO Ⅲ—Ⅳ級(jí)膠質(zhì)瘤患者，分析其復(fù)發(fā)時(shí)間和Cath D表達(dá)的關(guān)系。 結(jié)果：構(gòu)建包含300例膠質(zhì)瘤組織的2個(gè)組織芯片，分別包含600個(gè)位點(diǎn)，其中168例含腫瘤及瘤旁組織，132例含腫瘤及腫瘤副點(diǎn)組織。星形細(xì)胞腫瘤214例(WHO Ⅰ級(jí)39例，Ⅱ級(jí)58例，Ⅲ級(jí)57例，Ⅳ級(jí)60例)，室管膜細(xì)胞腫瘤37

3、例(WHO Ⅱ級(jí)20例，Ⅲ級(jí)17例)，少枝膠質(zhì)細(xì)胞瘤49例(WHO Ⅱ級(jí)25例，Ⅲ級(jí)24例)。Cath D在病理分級(jí)Ⅰ-Ⅱ、Ⅲ-Ⅳ級(jí)星形細(xì)胞腫瘤中表達(dá)陽(yáng)性率分別為56.84％、81.89％，有顯著差異(P<0.05)，并且陽(yáng)性程度的表達(dá)有顯著差異(P<0.05)，Ⅲ-Ⅳ星形細(xì)胞腫瘤與其瘤旁組織(61.6％)的表達(dá)率有差異(P<0.05)。Cath D在臨床分級(jí)Ⅱ、Ⅲ級(jí)的室管膜細(xì)胞腫瘤中表達(dá)的陽(yáng)性率及陽(yáng)性程度沒(méi)有顯著差異(P>0.05)，

4、室管膜細(xì)胞腫瘤與其瘤旁組織的表達(dá)有差異(P<0.05)。Cath D在臨床分級(jí)Ⅱ、Ⅲ級(jí)的少枝膠質(zhì)細(xì)胞腫瘤中的表達(dá)陽(yáng)性率分別為66.66％、86.95％，陽(yáng)性程度有顯著差異(P<0.05)，少枝膠質(zhì)細(xì)胞腫瘤與其瘤旁組織(40％)的表達(dá)有差異(P<0.05)。Western Blot蛋白定量分析12例膠質(zhì)瘤標(biāo)本，6例正常對(duì)照標(biāo)本的Cath D的表達(dá)，顯示各級(jí)別星形細(xì)胞腫瘤和少枝膠質(zhì)細(xì)胞腫瘤的Cath D表達(dá)明顯高于正常腦組織，Ⅱ級(jí)與Ⅲ\Ⅳ級(jí)

5、之間表達(dá)存在差異。隨訪(fǎng)53例患者的復(fù)發(fā)時(shí)間，Cath D陽(yáng)性表達(dá)患者復(fù)發(fā)時(shí)間為10.67±0.78月，陰性表達(dá)患者復(fù)發(fā)時(shí)間為15.23±1.34月，患者復(fù)發(fā)時(shí)間與Cath D的表達(dá)相關(guān)t=0.068<0.1。 結(jié)論：組織芯片是分析大樣本腫瘤病理的高效工具，Cath D表達(dá)與星形細(xì)胞腫瘤、少枝膠質(zhì)細(xì)胞腫瘤的病理分級(jí)呈正相關(guān)，可以作為判斷高級(jí)別星形細(xì)胞腫瘤及高級(jí)別少枝膠質(zhì)細(xì)胞腫瘤的分子標(biāo)記，組織蛋白酶 D 在膠質(zhì)瘤的表達(dá)與患者復(fù)發(fā)時(shí)