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![基于金納米籠的腫瘤標志物檢測及細胞成像研究.pdf_第1頁](https://static.zsdocx.com/FlexPaper/FileRoot/2019-3/19/12/501c872c-dfd8-49f1-818d-9aa003a9fe1a/501c872c-dfd8-49f1-818d-9aa003a9fe1a1.gif)
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文檔簡介
1、第一部分:
三磷酸腺苷(ATP)是生物體內(nèi)最小的能量單位,是生物體內(nèi)細胞所有生命活動的能量來源,對于維持生物體正常的機能具有至關(guān)重要的作用。在細胞受損或死亡后,細胞內(nèi)的ATP含量會明顯降低,所以ATP含量的變化可以用來反映細胞的變異和損傷,故通過檢測惡性腫瘤ATP濃度變化,可以了解其細胞代謝以及腫瘤化療中的整體細胞殺死量等情況。
金納米籠是一種形貌為中空、壁上多孔的納米立方體顆粒,它具有較大的光吸收截面,良好的光熱性
2、質(zhì),較好的生物相容性,對光波具有非常寬的的散射和吸收范圍等一系列優(yōu)點。本文具體研究內(nèi)容如下:
一、銀納米立方體顆粒、金納米籠狀顆粒的合成:
本文采用乙二醇還原硝酸銀的方法合成銀納米立方體,合成的銀納米立方體顆粒在50-60nm。以銀納米立方體為模版,通過置換法合成金納米籠狀顆粒。紫外分光光度檢測與電子顯微鏡表征結(jié)果表明,我們合成了形貌良好的粒徑為60-70nm的金納米籠。
二、基于金納米籠的ATP生物傳感器
3、的制備與ATP的檢測:
本文利用金納米籠的空心籠狀結(jié)構(gòu),在其內(nèi)部負載熒光物質(zhì),采用巰基修飾的DNA鏈及其互補鏈包裹金納米籠,使熒光物質(zhì)封堵在籠內(nèi)。為了方便分離,將金納米籠組裝到磁珠上。在最優(yōu)實驗條件下,可在5.0×10-8~1.0×10-6M范圍內(nèi)實現(xiàn)對ATP的檢測。該傳感器在生物醫(yī)學領(lǐng)域具有較大的應(yīng)用潛力,可用于不同目標分子的特異性檢測。為癌癥等重大疾病的早期診斷及治療提供新的途徑和方法。
三、ATP探針在細胞內(nèi)熒
4、光成像:
將金納米籠熒光探針置于含有腫瘤細胞的培養(yǎng)液中,激光共聚焦掃描顯微成像得到細胞的熒光成像圖片,結(jié)果表明,探針能夠與癌細胞內(nèi)的ATP反應(yīng)并釋放出熒光物質(zhì)。該體系有望應(yīng)用于運載治療癌癥等重大疾病的藥物,實現(xiàn)藥物的靶向載遞及可控釋放。
第二部分:
谷胱甘肽(GSH)廣泛存在于生物體的細胞中,由于其結(jié)構(gòu)的特殊性,使得它能夠參與機體內(nèi)的多種生理過程,在維持生物體內(nèi)巰基和硫化物的平衡及調(diào)節(jié)生物體內(nèi)氧化還原環(huán)境方
5、面起著至關(guān)重要的作用。而人體內(nèi)的某些疾病的發(fā)生,也可以通過GSH含量的改變反映出來。所以,對細胞中GSH含量的檢測有著重要的意義。本文以新型硒二唑化合物作為電化學探針,通過測量其峰電流的降低情況可以測量出GSH的濃度,本文主要研究內(nèi)容如下:
一、對電活性物質(zhì)的電極反應(yīng)過程及其與GSH的反應(yīng)機理進行研究:
新型電化學探針[1,3]-二硫雜環(huán)戊烯并[4,5-f]-2,1,3-苯并硒二唑-6-硫酮(DBT)的分子結(jié)構(gòu)中含有
6、Se-N鍵,具有較強的電化學活性,它與GSH反應(yīng)后,Se-N鍵會發(fā)生斷裂,因此利用此電化學物質(zhì)檢測GSH,不但反應(yīng)速度快、靈敏度高,而且還具有良好的選擇性。利用循環(huán)伏安法(CV)和示差脈沖伏安法(DPV)推導出DBT和GSH的反應(yīng)機理。DBT對GSH的檢測范圍為:1.0×10-10~9.0×10-10M,線性相關(guān)系數(shù)為R=0.9920。
二、對Ramos細胞中的巰基物進行了檢測:
為了研究DBT對生物試樣的檢測效果,
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