二甲雙胍對人肝癌細胞HepG2增殖及REDD1、cyclinD1表達的影響.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的:探討二甲雙胍作用于人肝癌 HepG2細胞后,對人肝癌細胞 HepG2增殖以及對REDD1、cyclinD1表達變化的影響。
  方法:以不同濃度(0.0、2.5、5.0、10.0mmol/L)二甲雙胍處理 HepG2細胞,即實驗按上述不同二甲雙胍濃度共分四組。分別用四甲基偶氮唑鹽酶反應比色法(MTT)和流式細胞儀檢測各組細胞的增殖活性和細胞周期變化。并用逆轉錄-聚合酶鏈反應(RT-PCR)檢測細胞中 REDD1、cyclin

2、D1基因 mRNA的表達量,用蛋白印跡法(western blot)檢測細胞中REDD1、cyclinD1基因的蛋白的表達量。
  結果:二甲雙胍作用細胞48小時后,與對照組相比,二甲雙胍處理組的HepG2細胞增殖均明顯受到抑制(P<0.05);G1期細胞比例與對照組比較均明顯增加(P<0.05);RT-PCR檢測顯示各二甲雙胍處理組REDD1 mRNA的相對表達量均明顯高于對照組(P<0.01),cyclinD1 mRNA的相對

3、表達量均明顯低于對照組(P<0.05);western-blot檢測顯示二甲雙胍處理組 REDD1蛋白相對表達量與對照組比較明顯升高(P<0.01),cyclinD1蛋白相對表達量與對照組比較明顯下降(P<0.01)。
  結論:二甲雙胍可抑制 HepG2細胞的增殖活性,誘導 HepG2細胞生長周期阻滯于G1期,并上調HepG2細胞 REDD1基因 mRNA和蛋白的表達,抑制cyclinD1基因mRNA和蛋白的表達,呈濃度依賴性。

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